来源：期刊VIP网 时间：
作者：付佳琪;孙润洁;崔兴;
单位：山东中医药大学第一临床医学院;山东中医药大学第二附属医院肿瘤中心;
摘要：目的：探究多发性骨髓瘤细胞外泌体circRNA诱导破骨细胞分化、促进骨髓瘤骨病的作用机制，并探讨通过调控circRNA介导的细胞通讯干预骨髓瘤骨病的可行性。方法：TargetScan、miRanda及双荧光素酶报告实验预测并验证circ-G042080下游调控机制。应用电镜鉴定骨髓瘤U266细胞外泌体，RANKL诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞，通过将其与U266细胞伴或不伴外泌体共培养，借助TRAP染色、Von Kossa染色和Western blot明确U266细胞外泌体对破骨细胞分化的作用。通过对NOG小鼠尾静脉注射U266细胞构建人源性骨髓瘤移植瘤模型，应用microCT、免疫组化、免疫荧光评价骨髓瘤来源外泌体circ-G042080对骨破坏的作用。通过敲减或过表达circ-G042080，进一步明确其通过调控miR-6791-3p/HDAC4诱导破骨细胞分化的作用机制。结果：生信分析及双荧光素酶报告实验发现并验证了circ-G042080能够通过ce RNA机制，竞争性结合miR-6791-3p，以调控HDAC4表达。RANKL成功诱导RAW264.7细胞分化为破骨细胞，与U266细胞外泌体共培养后，TRAP、Von Kossa阳性细胞数显著增加（均P<0.01）,HDAC4、RANKL蛋白表达显著升高（均P<0.01），提示U266细胞外泌体对破骨细胞分化具有促进作用。与对照组小鼠相比，模型组小鼠表现出明显的骨质破坏、TRAP染色阳性的破骨细胞数目增加（P<0.01）,HDAC4、RANKL蛋白表达水平显著升高（均P<0.05），同时免疫荧光显示circ-G042080表达显著提高（P<0.01）。注射U266细胞外泌体后，小鼠股骨、脊柱、颅骨骨质破坏较模型组显著加重，circ-G042080及HDAC4、RANKL水平显著升高（均P<0.01）。最后，通过敲减或过表达circ-G042080证实了其调控miR-6791-3p/HDAC4轴，促进RANKL表达，进而诱导破骨细胞分化。结论：骨髓瘤外泌体circ-G042080可通过miR-6791-3p/HDAC4轴促进RANKL介导的破骨细胞分化，促进骨髓瘤骨病，有望成为新型生物标志物。
关键词：多发性骨髓瘤骨病;;外泌体;;circ-G042080;;组蛋白去乙酰化酶4;;核因子κB受体活化因子配体;;破骨细胞分化
基金资助：国家自然科学基金面上项目（82274491,82074348）;; 山东省自然科学基金创新发展联合基金（ZR2023LZL009）;; 济南市临床医学科技创新计划（202225014,202328072）
