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作者：陈燕;谢雪梅;张晓林;张晓玲;
单位：达州市中心医院检验科;达州职业技术学院医学影像检验系;成都医学院第二附属医院核工业四一六医院科技部;
摘要：目的：探讨紫草素对人早幼粒细胞白血病细胞自噬和凋亡的影响及可能的机制。方法：取对数生长期的人早幼粒细胞白血病细胞NB4，将其分为对照组（未处理的NB4细胞）、紫草素组（0.3μmol/L紫草素处理）、740Y-P组（15μmol/L PI3K/Akt/m TOR通路激活剂740Y-P处理）、紫草素+740Y-P组（0.3μmol/L紫草素与15μmol/L 740Y-P共同处理），处理24 h后，用于后续实验，CCK-8法检测各组细胞活力，单丹磺酰戊二酸染色检测细胞自噬囊泡的聚集情况，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot检测各组细胞中Beclin1、LC3、p62、Bax、cleaved caspase-3、Bcl-2及PI3K/Akt/m TOR通路相关蛋白的表达。结果：与对照组比较，紫草素组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量升高，OD450值（24、48 h）及Bcl-2、p62蛋白相对表达量降低（均P<0.05）；与对照组比较，740Y-P组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量降低，OD450值（24、48 h）及Bcl-2、p62蛋白相对表达量升高（均P<0.05）；与紫草素组比较，紫草素+740Y-P组NB4细胞内紫色点状荧光强度、细胞凋亡率及Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、cleaved caspase-3、Bax蛋白相对表达量降低，OD450值（24、48 h）及Bcl-2、p62蛋白相对表达量升高（均P<0.05）。与对照组比较，紫草素组NB4细胞中PI3K/Akt/m TOR通路相关蛋白p-PI3K、p-Akt、p-m TOR蛋白表达显著降低，而740Y-P组显著升高（均P<0.05）；与紫草素组比较，紫草素+740Y-P组NB4细胞中p-PI3K、p-Akt、p-m TOR蛋白表达显著升高（均P<0.05）。结论：紫草素可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路促进NB4细胞自噬与凋亡。
关键词：紫草素;;磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路;;早幼粒细胞白血病;;自噬;;细胞凋亡
