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作者：范卓异;梁爱斌;
单位：复旦大学附属中山医院全科医学科;同济大学附属同济医院血液科;
摘要：目的:探讨靶向沉默Ku80对T-ALL细胞系Jurkat化疗敏感性的影响以及潜在机制。方法:通过RT-qPCR及Western blot技术检测6种不同血液肿瘤细胞系中Ku80基因的转录与表达水平；设计并构建Ku80特异性shRNA干扰质粒并转染T-ALL细胞系Jurkat后检测Ku80蛋白表达；CCK-8技术检测Ku80沉默后Jurkat细胞的增殖能力；软琼脂克隆形成技术、流式细胞术及Western blot技术分别检测Ku80沉默协同化疗药物依托泊苷(VP16)处理细胞4 h后Jurkat细胞的克隆形成能力、凋亡水平及DNA损伤蛋白γH2AX的表达水平。结果:在选取的6种不同血液肿瘤细胞系中，T-ALL细胞系Jurkat中Ku80的mRNA及蛋白水平均最高。构建的shRNA质粒成功靶向沉默了Jurkat细胞中Ku80的表达。Ku80靶向沉默后Jurkat细胞增殖能力明显下降(P<0.05);VP16孵育前后，Ku80靶向沉默均可显著降低Jurkat细胞克隆形成能力(P<0.01)、提高Jurkat细胞凋亡水平(P<0.01),并且γH2AX的表达水平显著提高(P<0.05)。结论:靶向沉默Ku80表达可增强T-ALL细胞系Jurkat对化疗药物VP16的敏感性，这或与其造成的DNA损伤积累水平增加有关。
关键词：Ku80;;依托泊苷;;Jurkat细胞;;DNA损伤反应
基金资助：国家自然科学基金重点项目(81830004)
