来源：期刊VIP网 时间：
作者：张婷;刘永蛟;张蕾;周欣宇;贾秀红;
单位：滨州医学院附属医院儿科;
摘要：目的:探讨积雪草酸(asiatic acid, AA)对人耐阿霉素(adriamycin, ADR)慢性髓系白血病K562/ADR细胞多药耐药的逆转作用及其机制。方法:采用CCK-8法检测K562细胞和K562/ADR细胞对ADR的耐药性；CCK-8法检测AA对K562/ADR细胞活力的影响及对ADR敏感性的增强作用；无毒剂量的AA(10、20μmol/L)处理K562/ADR细胞后，流式细胞术检测细胞内ADR的平均荧光强度；实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance protein-1,MRP1)、P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、β-连环蛋白(β-catenin)、原癌基因(C-myc)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测MRP1、P-gp、β-catenin、C-myc、cyclinD1蛋白的表达水平。20μmol/L AA联合Wnt/β-catenin通路激动剂WAY-262611(5μmol/L)处理K562/ADR细胞后，Western blot法检测细胞内MRP1、P-gp、β-catenin、C-myc、cyclinD1蛋白表达水平的变化。结果:CCK-8检测结果显示，K562/ADR细胞的耐药性是K562细胞的56.57倍，具有稳定耐药性，差异具有统计学意义(P<0.05)。AA可呈浓度依赖性抑制K562/ADR细胞的增殖活力(r=0.9666)。与0μmol/L AA组相比，10、20μmol/L AA组可明显增强细胞内ADR的平均荧光强度(P<0.05),逆转细胞对ADR的耐药性(P<0.05),明显下调细胞中MRP1、P-gp、β-catenin、C-myc和cyclinD1 mRNA和蛋白的表达(P均<0.05)。与单用20μmol/L AA组相比，20μmol/L AA+WAY组细胞中MRP1、P-gp、β-catenin、C-myc、cyclinD1蛋白表达水平均明显升高(P均<0.05)。结论:AA呈浓度依赖性抑制K562/ADR细胞增殖，逆转该细胞对ADR的耐药性，其逆转机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路后下调耐药相关蛋白MRP1和P-gp的表达有关。
关键词：积雪草酸;;慢性髓系白血病;;多药耐药;;Wnt/β-catenin信号通路
基金资助：山东省自然科学基金(ZR2014HL032);; 山东省医药卫生科技发展计划项目(2017WS038)
