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作者：赵莉;唐东海;任春晓;赵恺;
单位：徐州医科大学血液病研究所;江苏省骨髓干细胞重点实验室;徐州医科大学附属医院血液科;
摘要：目的：制备小鼠费城染色体阳性（Ph~+）原代细胞并构建B淋巴细胞白血病（B-ALL）小鼠模型。方法：利用逆转录病毒将带有BCR-ABL P210融合基因的质粒转入C57BL/6J小鼠骨髓细胞中，输注给9 Gy总致死剂量60Co γ射线照射的同系小鼠后建立第一代Ph~+骨髓细胞的小鼠模型，然后获取发病小鼠脾脏和骨髓的原代细胞冻存。C57BL/6J小鼠经亚致死剂量照射后，接受第一代Ph~+细胞进行体内传代，顺序传代获得第三、四代Ph~+细胞及小鼠B-ALL模型。分别应用流式细胞术、H&E染色、外周血涂片等对建模小鼠进行免疫表型分析及病变检测。结果：输注含有P210-NGFR逆转录病毒的骨髓细胞后，小鼠出现体重明显下降、双下肢瘫痪、弓背等症状。发病小鼠的外周血涂片中可观察到原始和幼稚淋巴细胞。H&E染色结果显示，发病小鼠肝脏小叶中央静脉周围以及肝脏边缘有明显的白血病细胞浸润。流式细胞术检测结果显示，发病小鼠脾脏中CD19+NGFR+细胞随传代增加百分率逐渐升高，G1、G2和G3分别为19.0%、47.3%和61.0%。免疫表型分析结果表明，Ph~+细胞在B淋巴细胞中稳定传代，且随着传代增多Ph~+B淋巴细胞占比显著提高。结论：本研究成功制备小鼠Ph~+原代细胞，并顺利完成体内传代及B-ALL小鼠模型构建。
关键词：费城染色体;;B淋巴细胞白血病;;融合基因;;小鼠模型
基金资助：徐州医科大学附属医院科技发展基金优秀人才基金项目（XYFY2021013）;; 江苏省研究生科研与实践创新计划项目（KYCX21＿2686）
