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作者:李旭;张国福;宋颖军;杨阳;
单位:江西中医药大学附属医院;
摘要:目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、蛋白酪氨酸激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)双信号通路探究补阳还五汤促进骨髓间充质干细胞(MSCs)趋化迁移治疗脊髓外伤性截瘫的机制。方法 将大鼠分为11组,即假手术组、空白对照组(均灌胃等量生理盐水)、补阳还五汤组(灌胃25 g/kg补阳还五汤)、MSCs组(尾静脉注射1 ml MSCs)、补阳还五汤+MSCs组(灌胃25 g/kg补阳还五汤同时尾静脉注射1 ml MSCs)、MSCs+LY294002组(尾静脉注射1 ml MSCs和LY294002 40 mg/kg)、MSCs+Stattic组(尾静脉注射1 ml MSCs和Stattic 3 mg/kg)、MSCs+LY294002+Stattic组(尾静脉注射1 ml MSCs、LY294002 40 mg/kg和Stattic 3 mg/kg)、补阳还五汤+MSCs+LY294002组(灌胃25 g/kg补阳还五汤,同时尾静脉注射1 ml MSCs和LY294002 40 mg/kg)、补阳还五汤+MSCs+Stattic组(灌胃25 g/kg补阳还五汤,同时尾静脉注射1 ml MSCs和Stattic 3 mg/kg)、补阳还五汤+MSCs+LY294002+Stattic组(灌胃25 g/kg补阳还五汤,同时尾静脉注射1 ml MSCs、LY294002 40 mg/kg和Stattic 3 mg/kg),各30只。采用改良Tarlov评分、斜板试验和皮层体感诱发电位波潜伏期测定大鼠脊髓功能;免疫组织化学染色检测脊髓组织中Brdu阳性细胞数;Western印迹检测脊髓组织中p-Akt、p-JAK、p-STAT3、肌动蛋白、糖蛋白(gp)130、IL-6蛋白表达。结果 在1、3、5 w时,补阳还五汤+MSCs组Tarlov评分和倾斜平面临界角度明显高于MSCs组,皮层体感诱发电位波潜伏期明显低于MSCs组(P<0.05);MSCs+LY294002+Stattic组Tarlov评分和倾斜平面临界角度明显高于MSCs+LY294002组,皮层体感诱发电位波潜伏期和p-Akt、p-JAK、p-STAT3、gp130、IL-6蛋白表达显著低于MSCs+LY294002组(P<0.05);补阳还五汤+MSCs+LY294002+Stattic组Tarlov评分和倾斜平面临界角度明显高于补阳还五汤+MSCs+LY294002组,皮层体感诱发电位波潜伏期和p-Akt、p-JAK、p-STAT3、gp130、IL-6蛋白表达明显低于补阳还五汤+MSCs+LY294002组(P<0.05)。移植5 w后,补阳还五汤+MSCs组Brub标记阳性细胞数明显多于MSCs组(P<0.05);补阳还五汤+MSCs+LY294002组Brub标记阳性细胞数明显多于补阳还五汤+MSCs组(P<0.05);补阳还五汤+MSCs+LY294002+Stattic组Brub标记阳性细胞数明显多于补阳还五汤+MSCs+Stattic组(P<0.05)。结论 补阳还五汤促进MSCs迁移通过抑制PI3K/Akt信号和JAK2/STAT3信号通路恢复脊髓功能。
关键词:磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路;;蛋白酪氨酸激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)信号通路;;补阳还五汤;;骨髓间充质干细胞;;脊髓外伤性截瘫
基金资助:国家自然科学基金项目(No.81860856)