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作者:赵宏阳;张永健;赵振伟;
单位:开滦医疗集团林西医院普外科;
摘要:目的 探究S期激酶相关蛋白(Skp)2通过调控细胞周期抑制蛋白(p27Kip1)对胃癌细胞迁移及侵袭的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测体外培养的人胃上皮细胞GES-1及4种胃癌细胞(HGC-27、MKN45、MGC-803、BGC-823)中Skp2、p27Kip1 mRNA表达。将BGC-823分为空白对照(NG)组、转染对照(si-control)组、转染(Skp2-siRNA)组。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力;采用qRT-PCR检测各组细胞Skp2、p27Kip1 mRNA表达水平;Transwell检测各组细胞侵袭能力;划痕法检测各组细胞划痕愈合率;Western印迹检测各组细胞Skp2、p27Kip1、兔抗人细胞周期调节因子(c-Myc)、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果 与GES-1相比,HGC-27、MKN45、MGC-803、BGC-823中Skp2 mRNA表达显著升高,p27Kip1 mRNA表达显著下降(P<0.05)。由于BGC-823中Skp2 mRNA表达水平最高,故后续使用BGC-823进行细胞转染实验。与NG、si-control组相比,Skp2-siRNA组细胞存活率、Skp2 mRNA表达显著下降,p27Kip1 mRNA表达显著上调,划痕愈合率、细胞侵袭数明显降低,Skp2、CyclinD1、c-Myc、MMP-9、MMP-2蛋白表达明显下降,p27Kip1蛋白表达显著上升(均P<0.05)。结论 Skp2-siRNA可上调p27Kip1表达并抑制胃癌细胞的迁移及侵袭。
关键词:S期激酶相关蛋白2;;细胞周期抑制蛋白;;迁移;;侵袭
基金资助:河北省卫生厅科研基金项目(20191348)