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作者:胡梦妮;张小蕾;荣臻;汪瑶;李亚楠;马骏;
单位:湖北中医药大学针灸骨伤学院;
摘要:目的 观察中药方天麻钩藤饮对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠行为学及纹状体磷脂酰激醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)及其下游凋亡因子B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、胱天蛋白酶(caspase)-3等蛋白含量的影响,探究中药方天麻钩藤饮治疗PD的作用机制。方法 通过UPLC/Q-TOF MS对天麻钩藤饮水煎液的化学成分进行分析,检测出10种化合物。将C57/BL小鼠随机分为对照(Ctrl)组、模型(MPTP)组及天麻钩藤饮(MPTP+TG)组各10只。采用腹腔注射MPTP[30 mg/(kg·d)],连续注射7 d,建立PD小鼠模型。Ctrl组和MPTP组给予生理盐水0.1 ml/10 g剂量灌胃,MPTP+TG组在MPTP注射2 h后予以天麻钩藤饮[14.82 g/(kg·d)]灌胃治疗。治疗结束后对各组进行旷场实验评价小鼠行为学改变。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测小鼠纹状体PI3K、Akt、Bax、Bcl-2、caspase-3等mRNA表达水平,并用Western印迹分析测定蛋白表达水平。结果 与Ctrl组比较,MPTP组出现明显的行为障碍,天麻钩藤饮给药后明显增加小鼠的自主运动及探索行为(P<0.05)。与Ctrl组比较,MPTP组PI3K、Bcl-2、Akt mRNA及酪氨酸羟化酶(TH)、p-PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白含量显著下调,Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白含量显著上调(P<0.05,P<0.01),天麻钩藤饮给药后明显逆转以上指标趋势。结论 天麻钩藤饮可能通过激活PD小鼠纹状体中PI3K/Akt信号通路来抑制细胞凋亡。
关键词:帕金森病;;天麻钩藤饮;;细胞凋亡;;磷脂酰激醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)
基金资助:国家自然科学基金项目(No.81473788);; 国家重点研发计划项目(No.2020YFC0845800)