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作者：林明利;郑美玲;卢宏全;林耀庭;
单位：儋州市人民医院检验科;海南西部中心医院肿瘤内科;儋州市人民医院普外科;
摘要：目的 探讨CircWAC调控miR-525-5p/双特异性磷酸酶(DUSP)16轴对乳腺癌细胞的上皮间质转化(EMT)和紫杉醇(PTX)耐药性影响。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测人乳腺癌MDA-MB-231,MDA-MB-468,MCF-7和SKBR3细胞及人正常乳腺上皮细胞MCF10A中CircWAC和miR-525-5p的表达；Western印迹检测各乳腺癌细胞系DUSP16表达；将MCF-7细胞分为CON组、pcDNA组、pcDNA-CircWAC组、sh-NC组、sh-CircWAC组、sh-CircWAC+miR-NC组、sh-CircWAC+miR-525-5pinhibitor组；RT-qPCR法检测细胞CircWAC和miR-525-5p表达；划痕愈合实验检测细胞迁移；Transwell检测细胞侵袭情况；CCK-8法检测各组细胞在不同浓度PTX(0、5、10、15、20、25μmol/L)处理48 h后的存活率；Western印迹检测细胞DUSP16、E-cadherin、N-cadherin、vimentin、snail2蛋白表达。双荧光素酶报告基因检测分析CircWAC和miR-525-5p及miR-525-5p和DUSP16的关系。结果 与MCF10A细胞相比，不同乳腺癌细胞CircWAC和DUSP16蛋白高表达，miR-525-5p低表达，其中MCF-7细胞中CircWAC和DUSP16蛋白表达最高，miR-525-5p表达最低，差异显著(P<0.05),因此后续选择MCF-7细胞进行转染实验；与CON和pcDNA组相比，pcDNA-CircWAC组细胞CircWAC表达、划痕愈合率、细胞侵袭个数、DUSP16、N-cadherin、vimentin、snail蛋白显著升高，miR-525-5p表达、E-cadherin蛋白和细胞对PTX敏感性显著下降(P<0.05);与CON和sh-NC组相比，sh-CircWAC组细胞CircWAC表达、划痕愈合率、细胞侵袭个数、DUSP16、N-cadherin、vimentin、snail蛋白显著降低，miR-525-5p表达、E-cadherin蛋白和细胞对PTX敏感性显著升高(P<0.05);下调miR-525-5p表达会减弱沉默CircWAC对MCF-7细胞迁移、侵袭、EMT的抑制作用，增加MCF-7细胞对PTX的耐药性。CircWAC和miR-525-5p、miR-525-5p和DUSP16存在靶向调控关系。结论 沉默CircWAC表达可能通过升高miR-525-5p表达而下调DUSP16表达进而抑制MCF-7细胞迁移、侵袭和EMT过程，并减弱MCF-7细胞对PTX的耐药性。
关键词：CircWAC;;miR-525-5p;;DUSP16;;乳腺癌细胞;;上皮间质转化;;紫杉醇耐药性
基金资助：海南省卫生健康行业科研项目(20A200112)
