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作者:徐晓玮;阿迪娜·乌提库尔;张红莉;石雨薇;
单位:新疆医科大学第二附属医院血液科;
摘要:目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)PVT1对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法:q RT-PCR检测PVT1在人B淋巴母细胞IM-9和DLBCL细胞OCI-Ly1、OCI-Ly3、OCI-Ly4、OCILy10中的表达。将OCI-Ly1细胞分为si-NC、si-PVT1、si-PVT1+miR-20a-5p inhibitor和si-PVT1+miR-20a-5p inhibitor+si-HMGA2共4组;将OCI-Ly3细胞分为Control、PVT1、PVT1+miR-20a-5p mimic和PVT1+miR-20a-5p mimic+HMGA2共4组。双荧光素酶报告基因实验验证PVT1和miR-20a-5p的靶向关系,以及miR-20a-5p和HMGA2的靶向关系;CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测HMGA2蛋白表达。结果:OCI-Ly1、OCILy3、OCI-Ly4、OCI-Ly10中PVT1表达显著高于IM-9细胞;双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-20a-5p可靶向结合于PVT1,HMGA2为miR-20a-5p的靶基因。在OCI-Ly1细胞中,si-PVT1组细胞增殖能力和HMGA2蛋白表达显著低于si-NC组(P<0.05),细胞凋亡水平显著高于si-NC组(P<0.001);si-PVT1+miR-20a-5p inhibitor组细胞增殖能力显著高于si-PVT1组(P<0.01),细胞凋亡水平显著低于si-PVT1组(P<0.001);si-PVT1+miR-20a-5p inhibitor+si-HMGA2组细胞增殖能力显著低于si-PVT1+miR-20a-5p inhibitor组(P<0.01),细胞凋亡水平显著高于si-PVT1+miR-20a-5p inhibitor组(P<0.001)。在OCI-Ly3细胞中,PVT1组细胞增殖能力和HMGA2蛋白表达显著高于Control组(P<0.05),细胞凋亡水平显著低于Control组(P<0.001);PVT1+miR-20a-5p mimic组细胞增殖能力显著低于PVT1组(P<0.001),细胞凋亡水平显著高于PVT1组(P<0.001);PVT1+miR-20a-5p mimic+HMGA2组细胞增殖能力显著高于PVT1+miR-20a-5p mimic组(P<0.05),细胞凋亡水平显著低于PVT1+miR-20a-5p mimic组(P<0.001)。结论:PVT1通过调控miR-20a-5p/HMGA2信号轴促进DLBCL细胞增殖,抑制其凋亡。
关键词:lncRNA PVT1;;弥漫性大B细胞淋巴瘤;;增殖;;凋亡
基金资助:新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2022D01C422)