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作者:沈家生;黄海斌;吴康中;
单位:湖州市第一人民医院普外科;
摘要:目的 研究长链非编码(Lnc)RNA肿瘤发生抑制因子7反义RNA(ST7-AS)1调控miR-490-3p对结肠癌细胞增殖凋亡、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ST7-AS1和miR-490-3p在结肠癌组织、细胞中表达。将ST7-AS1小干扰RNA转染到结肠癌细胞HCT116,采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、Transwell实验分析干扰ST7-AS1表达对HCT116细胞恶性生物学行为的影响。Western印迹法检测裂解的半胱氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase)-3、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达。双荧光素酶报告实验用于确定ST7-AS1对miR-490-3p靶向调控作用。结果 ST7-AS1在结肠癌组织、细胞中上调表达,miR-490-3p下调表达,差异显著(P<0.05)。干扰ST7-AS1表达能显著降低HCT116细胞活力、迁移和侵袭数量及CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达,明显提高凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达(P<0.05)。miR-490-3p与ST7-AS1序列直接结合,干扰或过表达ST7-AS1分别明显增加或降低miR-490-3p表达水平(P<0.05)。抑制miR-490-3p表达明显降低了干扰ST7-AS1表达对HCT116细胞上述指标的影响(P<0.05)。结论 干扰ST7-AS1能够诱导结肠癌细胞凋亡,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向下调miR-490-3p有关。
关键词:结肠癌;;长链非编码RNA;;肿瘤发生抑制因子7反义RNA1;;miR-490-3p;;增殖;;凋亡;;迁移;;侵袭
基金资助:浙江省科技计划项目(2018C37087)