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作者：张守刚;陈英男;陈鹏;刘志超;
单位：滕州市中心人民医院肝胆外科;滕州市中心人民医院消化内科;
摘要：目的 探究长链非编码RNA肌蛋白(MSC)反义RNA(LncRNA MSC-AS)1通过调控miR-579-3p/含跨膜和四肽重复序列的蛋白(TMTC)3轴对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响及作用机制。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同肝癌细胞中MSC-AS1、miR-579-3p、TMTC3 mRNA表达，将HepG2细胞分为空白对照(NC)组、siRNA阴性对照(si-NC)组、si-MSC-AS1组、si-MSC-AS1+miR inhibitor阴性对照(si-MSC-AS1+miR-NC)组、si-MSC-AS1+miR-579-3p inhibitor组。转染培养48 h后，qRT-PCR检测各组细胞中MSC-AS1、miR-579-3p、TMTC3 mRNA表达；流式细胞术和Transwell小室分别评估细胞凋亡和侵袭；克隆形成实验和CCK-8法测量细胞增殖；Western印迹评估B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的胱天蛋白酶(cleaved caspase)-3蛋白表达；双荧光素酶实验进行miR-579-3p与MSC-AS1和TMTC3之间的靶向关系验证。结果 与人正常肝细胞相比，肝癌细胞中MSC-AS1和TMTC3表达明显升高，miR-579-3p表达明显下降，且HepG2细胞变化最明显(P<0.05);与NC组和si-NC组相比，si-MSC-AS1组TMTC3 mRNA表达、细胞增殖活性、克隆形成数量、侵袭数及Bcl-2蛋白表达下降，miR-579-3p表达、细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达增高，差异显著(P<0.05);回补实验中发现，MSC-AS1敲低对HepG2细胞增殖、侵袭和凋亡的作用被miR-579-3p inhibitor明显逆转(P<0.05);双荧光素酶活性实验验证了MSC-AS1、TMTC3均含有miR-579-3p的结合位点，存在靶向关系。结论 敲低MSC-AS1通过miR-579-3p上调和TMTC3下调发挥促进肝癌细胞凋亡并抑制侵袭、增殖的作用。
关键词：LncRNA肌蛋白(MSC)反义RNA (LncRNA MSC-AS)1;;miR-579-3p/含跨膜和四肽重复序列的蛋白(TMTC)3轴;;肝癌;;增殖;;凋亡;;侵袭
