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作者：王新梅;万莉;
单位：新疆医科大学附属中医医院新疆维吾尔自治区中医医院妇科;
摘要：目的 探究蛙皮素受体亚型(BRS)-3在宫颈癌组织中表达及对宫颈癌细胞增殖、能量代谢和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶(PK)B通路的影响。方法 以实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western印迹法检测人宫颈癌组织及其癌旁组织、体外培养的人子宫颈上皮细胞及人宫颈癌细胞系C-33A、Hela、Hela229中BRS-3 mRNA及蛋白表达。体外培养人宫颈癌细胞C-33A并随机分为对照组、BRS-3 siRNA组、BRS-3 siRNA阴性对照组、BRS-3 siRNA+PI3K/PKB激活剂(740Y-P)组，分组处理后以qRT-PCR及Western印迹法检测各组细胞BRS-3 mRNA和蛋白及PI3K/PKB通路相关蛋白表达；以Edu染色与流式细胞实验分别检测各组C-33A细胞增殖、凋亡；监测细胞外酸化率(ECAR)及氧气消耗速率(OCR)来观察各组细胞糖酵解能力及线粒体代谢水平，比较其基础糖酵解、糖酵解能力值、糖酵解储备值、基础呼吸值、储备呼吸值、三磷酸腺苷(ATP)产量；以Western印迹法检测各组细胞能量代谢相关蛋白-葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、己糖激酶(HK)2、丙酮酸激酶(PK)M2蛋白表达。结果 与癌旁组织相比，宫颈癌组织BRS-3蛋白与mRNA表达明显升高(P<0.05);与人子宫颈上皮细胞相比，C-33A、Hela、Hela229细胞BRS-3蛋白与mRNA表达明显升高(P<0.05)。与对照组相比，BRS-3 siRNA组细胞增殖率、BRS-3蛋白与mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-PKB/PKB蛋白表达、基础糖酵解、糖酵解能力值、糖酵解储备值、基础呼吸值、储备呼吸值、ATP产量、GLUT1及HK2、PKM2蛋白表达明显降低，凋亡率明显升高(P<0.05);BRS-3 siRNA阴性对照组细胞各指标无显著差异(P>0.05)。与BRS-3 siRNA组相比，BRS-3 siRNA+740Y-P组细胞增殖率、p-PI3K/PI3K、p-PKB/PKB蛋白表达、基础糖酵解、糖酵解能力值、糖酵解储备值、基础呼吸值、储备呼吸值、ATP产量、GLUT1及HK2、PKM2蛋白表达明显升高，凋亡率明显降低(P<0.05)。结论 BRS-3表达在宫颈癌组织与细胞中表达升高，敲低BRS-3表达可抑制PI3K/PKB通路激活，进而降低宫颈癌细胞糖酵解能力及线粒体代谢水平，最终通过减弱能量代谢而对宫颈癌起到抗增殖及促凋亡作用。
关键词：蛙皮素受体亚型(BRS)-3;;宫颈癌;;增殖;;能量代谢;;磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶(PK)B
基金资助：新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(2021D01C236)
