来源：期刊VIP网 时间：
作者：熊鹿;林芳;刘云兵;吴屹;
单位：电子科技大学医学院附属绵阳医院·绵阳市中心医院老年科;
摘要：目的 探究褪黑素通过腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控内质网应激对载脂蛋白(APO)E基因敲除小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)钙化的影响。方法 将6～8周龄动脉粥样硬化雄性APOE基因敲除小鼠VSMC培养14 d,随机分为对照(Con)组、SIR(模拟缺血再灌注)组、SIR+褪黑素(Mel)10、100、1 000μmol/L组、SIR+Mel+化合物C(AMPK抑制剂)组、SIR+Mel+MHY1485(mTOR激动剂)组、β-甘油磷酸酯(GP)+Mel+化合物C组、β-GP+Mel+MHY1485组。利用茜素红染色观察钙沉积物，碱性磷酸酶(ALP)活性用ALP试剂盒测定。用模拟缺血再灌注诱导VSMC细胞内质网应激状态，并用褪黑素预处理。Western印迹用于检测内质网应激标志分子葡萄糖调节蛋白(GRP)78和C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达。结果 褪黑素可明显降低内质网应激标志分子GRP78和CHOP蛋白表达，化合物C、MHY1485明显抑制褪黑素对β-甘油磷酸酯(GP)诱导VSMC钙化后p-AMPK和mTOR蛋白表达的影响(P<0.05)。结论 褪黑素通过调节AMPK/mTOR通路，减轻了APOE基因敲除小鼠心脏平滑肌细胞模拟缺血再灌注损伤诱导的内质网应激，抑制β-GP诱导的VSMC钙化。
关键词：褪黑素;;内质网应激;;成骨表型转变;;载脂蛋白(APO)E基因敲除小鼠
基金资助：2020年四川省卫生健康科研课题(20PJ264)
