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作者:陈子扬;陈凯铭;郝晓凤;谢立科;
单位:福建省中医药科学院;中国中医科学院眼科医院;
摘要:目的 基于Janus激酶(JAK)2/信号转导与转录激活子(STAT)3信号通路探讨祛积通络方含药血清对缺氧条件下人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)损伤的保护作用。方法 将ARPE-19细胞分为正常组、模型组、JAK2/STAT3通路抑制剂(AG490)组、空白血清组、祛积通络方含药血清组、祛积通络方含药血清联合STAT3激动剂(Colivelin)组。观察细胞划痕试验、侵袭试验,使用实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测JAK2和STAT3 mRNA表达水平,Western印迹检测JAK2、STAT3、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组ARPE-19细胞迁移和侵袭能力增强,祛积通络方含药血清组和AG490组上述指标较模型组降低,差异均显著(P<0.05);祛积通络方含药血清联合Colivelin组上述指标均显著高于祛积通络方含药血清组(P<0.05)。模型组ARPE-19细胞JAK2和STAT3 mRNA水平较正常组显著增加,祛积通络方含药血清组和AG490组JAK2和STAT3 mRNA水平较模型组显著降低(P<0.05);祛积通络方含药血清联合Colivelin组STAT3 mRNA水平显著高于祛积通络方含药血清组(P<0.05)。模型组ARPE-19细胞JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白水平较正常组显著增加(P<0.05);祛积通络方含药血清组和AG490组JAK2和p-STAT3及祛积通络方含药血清组p-JAK2蛋白表达水平较模型组显著降低(均P<0.05),祛积通络方含药血清联合Colivelin组p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平显著高于祛积通络方含药血清组(P<0.05),JAK2、STAT3蛋白表达水平与祛积通络方含药血清组未见明显差异(P>0.05)。结论 在缺氧条件下,ARPE-19细胞迁移和侵袭率增加,祛积通络方含药血清可抑制ARPE-19细胞的迁移和侵袭能力,这与JAK2-STAT3信号通路有关。
关键词:祛积通络方;;Janus激酶(JAK)2/信号转导与转录激活子(STAT)3信号通路;;视网膜静脉阻塞;;视网膜色素上皮细胞;;缺氧
基金资助:中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目(CI2021A02606);; 中国中医科学院眼科医院高水平中医医院人才方向项目(GSP5-83)