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作者:朱士娜;党新新;张晗;
单位:滕州市中心人民医院妇二科;滕州市中心人民医院妇科;
摘要:目的 探究欧前胡素(IMP)调节Notch/Snail信号通路对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 用7.5~240.0μg/ml的IMP处理人子宫内膜癌细胞(HEC-1-A),噻唑蓝(MTT)法用来检测细胞活力,筛选IMP浓度。将对数期HEC-1-A细胞随机分为对照(Control)组、IMP低、中、高浓度(IMP-L、-M、-H)组、IMP高浓度+Notch激活剂(IMP-H+VPA-d4)组;平板克隆法、流式细胞术用来检测细胞增殖、凋亡能力;Western印迹法用来检测HEC-1-A细胞细胞周期蛋白(Cyclin)D1、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3、EMT蛋白[上皮型钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)]、Notch/Snail信号通路蛋白表达;小鼠成瘤实验用来检测IMP对EC移植瘤和通路蛋白的影响。结果 根据IMP浓度筛选的结果,选择30、60、120μg/ml IMP为实验浓度。与Control组比较,IMP-L、-M、-H组HEC-1-A细胞克隆形成数显著降低,CyclinD1、N-Cadherin、Vimentin、Notch、Snail蛋白表达显著下调,细胞凋亡率显著升高,caspase-3、E-Cadherin蛋白表达显著上调,呈剂量依赖性(P<0.05);与IMP-H组相比,IMP-H+VPA-d4组克隆形成数升高,CyclinD1、N-Cadherin、Vimentin、Notch、Snail蛋白表达上调,细胞凋亡率降低、caspase-3、E-Cadherin蛋白表达下调,差异显著(P<0.05)。移植瘤实验显示,与Control组比较,IMP组肿瘤体积、质量比降低,Notch、Snail蛋白表达下调,差异显著(P<0.05)。结论 IMP能够抑制EC细胞增殖、凋亡和EMT过程,可能通过调节Notch/Snail信号通路实现。
关键词:子宫内膜癌;;欧前胡素;;Notch/Snail信号通路;;增殖;;凋亡;;上皮间质转化