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作者：刁统伟;康泰;王洪洋;
单位：滕州市中心人民医院肛肠外科;滕州市中心人民医院胃肠外科;
摘要：目的 探讨长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA(LncRNA SLC16A1-AS)1靶向调控微小RNA(miR)-149-5p/成纤维细胞生长因子(FGF)5通路对人结肠癌细胞上皮-间质转化(EMT)和细胞周期的影响。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人结肠癌组织及细胞SLC16A1-AS1、miR-149-5p、FGF5 mRNA表达；将HCT116细胞分为干扰SLC16A1-AS1(si-SLC16A1-AS1)组、阴性对照(si-NC)组、si-SLC16A1-AS1+阴性对照(pcDNA3.1)组、si-SLC16A1-AS1+过表达FGF5(pcDNA3.1 FGF5)组、si-SLC16A1-AS1+miR-149-5p抑制剂(miR-149-5p inhibitor)组、si-SLC16A1-AS1+阴性对照(inhibitor NC)组，并以未转染的细胞为空白组。噻唑蓝(MTT)、流式细胞仪、Transwell实验检测细胞增殖及细胞周期、迁移、侵袭；qRT-PCR检测SLC16A1-AS1、miR-149-5p、FGF5 mRNA及周期相关蛋白-细胞周期蛋白(cyclin)依赖激酶(CDK)4、cyclinD1表达；Western印迹检测FGF5及EMT相关蛋白-锌指转录抑制因子Snail、E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin表达；双荧光素酶验证SLC16A1-AS1与miR-149-5p关系。结果 SLC16A1-AS1、FGF5 mRNA表达在结肠癌组织及细胞中显著增加，miR-149-5p表达显著降低(P<0.05);与空白组、si-NC组相比，si-SLC16A1-AS1组G0/G1期、miR-149-5p、E-cadherin表达显著增加，增殖率、G2/M、S期、侵袭、迁移、SLC16A1-AS1、FGF5 mRNA、CDK4 mRNA、cyclinD1 mRNA、Snail、N-cadherin、FGF5表达显著降低(P<0.05);与si-SLC16A1-AS1+inhibitor NC组相比，si-SLC16A1-AS1+miR-149-5p inhibitor组G0/G1期、miR-149-5p、E-cadherin表达显著降低，增殖率、G2/M、S期、侵袭、迁移、FGF5 mRNA、CDK4 mRNA、cyclinD1 mRNA、Snail、N-cadherin、FGF5表达显著增加(P<0.05),SLC16A1-AS1表达无统计学差异(P>0.05);与si-SLC16A1-AS1+pcDNA 3.1组相比，si-SLC16A1-AS1+pcDNA3.1 FGF5组G0/G1期、E-cadherin表达显著降低，增殖率、G2/M、S期、侵袭、迁移、FGF5 mRNA、CDK4 mRNA、cyclinD1 mRNA、Snail、N-cadherin、FGF5表达显著增加(P<0.05),miR-149-5p、SLC16A1-AS1无统计学差异(P>0.05)。SLC16A1-AS1与miR-149-5p存在靶向关系(P<0.05)。结论 干扰LncRNA SLC16A1-AS1靶向miR-149-5p/FGF5通路抑制人结肠癌细胞EMT、细胞周期发展。
关键词：长链非编码RNA溶质载体家族16成员1反义RNA(LncRNA SLC16A1-AS)1;;微小RNA(miR)-149-5p/成纤维细胞生长因子(FGF)5;;结肠癌;;上皮间质转化;;细胞周期
基金资助：济宁医学院校级科研项目(JYFC2018FKJ064)
