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作者：宰晓哲;程晓燕;樊少卿;李小娜;马浩杰;潘博;赵峰;
单位：河南中医药大学第二附属医院日间手术室;
摘要：目的 探讨七氟烷对缺氧复氧(H/R)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)焦亡的影响及其机制。方法 采用SH-SY5Y细胞构建H/R损伤模型，设立正常对照(Control)组、H/R组及七氟烷处理(SEV)组。细胞计数(CCK)-8检测细胞活力；乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞上清中LDH含量；实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测沉默信号调控因子(SIRT)1 mRNA表达；Western印迹检测NOD样受体蛋白(NLRP)3、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1、胃泌素(GSDM)D、微管相关蛋白1轻链(LC)3B和SIRT1蛋白表达；细胞免疫荧光检测LC3B蛋白水平。转染SIRT1抑制质粒，检测其对H/R诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响。结果 与Control组比较，H/R组SH-SY5Y细胞活性显著降低，细胞形态受损，细胞上清中LDH含量、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、LC3B、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ、Beclin-1表达、SIRT1 mRNA和蛋白表达显著升高，p62表达显著下降(P<0.05)。七氟烷处理可提升H/R诱导的SH-SY5Y细胞活性，降低细胞上清中LDH含量和细胞焦亡，同时进一步提升细胞自噬和SIRT1表达水平，差异显著(P<0.05)。SIRT1沉默可显著降低自噬水平，并显著扭转七氟烷在H/R诱导SH-SY5Y细胞损伤中的保护作用(P<0.05)。结论 七氟烷可通过上调SIRT1促进细胞自噬减轻缺氧复氧诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y焦亡和细胞损伤。
关键词：七氟烷;;焦亡;;自噬;;缺氧复氧;;人神经母细胞瘤细胞
