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作者：董子玉;翁翔宇;朱春凯;刘明巍;刘志彬;
单位：信阳职业技术学院检验技术学院;河南省人民医院检验科;
摘要：目的 探讨circFLI1介导微小RNA(miR)-548c-3p对肝癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法 体外培养肝癌细胞HepG2,分为si-NC组(转染si-NC)、si-circFLI1组(转染si-circ＿0000370)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-548c-3p组(转染miR-548c-3p mimics)、si-circFLI1+anti-miR-NC组(转染si-circ＿0000370和anti-miR-NC)、si-circFLI1+anti-miR-548c-3p组(转染si-circ＿0000370和anti-miR-548c-3p)。CCK-8法测定肝癌细胞增殖能力，Transwell法测定肝癌细胞的迁移和侵袭能力，流式细胞法测定肝癌细胞凋亡率，Western印迹测定肝癌细胞细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21和胱天蛋白酶(Caspase)-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关蛋白(Bax)蛋白表达，双荧光素酶报告基因实验验证circFLI1对miR-548c-3p的靶向作用，观察下调miR-548c-3p表达对裸鼠成瘤的影响。结果 48 h与72 h时，si-circFLI1组、miR-548c-3p组及si-circFLI1+anti-miR-NC组光密度(OD)值较si-NC组、miR-NC组均明显降低(P<0.05);si-circFLI1+anti-miR-548c-3p组较si-circFLI1+anti-miR-NC组OD值明显升高(P<0.05)。与si-NC组、miR-NC组相比，si-circFLI1组、miR-548c-3p组和si-circFLI1+anti-miR-NC组肝癌细胞迁移和侵袭数量明显降低(P<0.05);si-circFLI1+anti-miR-548c-3p组肝癌细胞迁移或侵袭数量较si-circFLI1+anti-miR-NC组明显升高(P<0.05)。与si-NC组、miR-NC组相比，si-circFLI1组、miR-548c-3p组和si-circFLI1+anti-miR-NC组肝癌细胞凋亡率明显增加(P<0.05);si-circFLI1+anti-miR-548c-3p组肝癌细胞凋亡较si-circFLI1+anti-miR-NC组明显降低，较miR-NC组凋亡率明升高(P<0.05)。与si-NC组、miR-NC组相比，si-circFLI1组与miR-548c-3p组肝癌细胞CyclinD1、p21蛋白表达明显降低，Caspase-3、Bax蛋白表达明显提高(P<0.05);与si-circ FIL+anti-miR-NC组比较，si-circFLI1+anti-miR-548c-3p组肝癌细胞CyclinD1、p21蛋白表达明显升高，Caspase-3、Bax蛋白明显降低(P<0.05)。在与WT-circFLI1共转染时，与miR-NC组相比，miR-548c-3p组细胞相对荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。而在与MUT-circFLI1共转染时，miR-548c-3p组与miR-NC组细胞相对荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。转染miR-548c-3p inhibitor的细胞产生的肿瘤重量显著轻于转染inhibitor NC对照组(P<0.05)。结论 circFLI1与miR-548c-3p为靶向关系，通过沉默circFLI1靶向提高miR-548c-3p表达，减弱肝癌细胞增殖、侵袭或迁移能力，促进其凋亡。
关键词：环状RNA FLI1;;微小RNA-548c-3p;;肝癌;;细胞生物学行为
基金资助：河南省职业教育教学改革研究与实践项目(豫教(2024)05929)
