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作者：李俊;沈伟;刘文军;肖瑶;王思夷;
单位：武汉市第四医院神经内科;
摘要：目的 评估缺氧诱导因子(HIF)-1α对星形胶质细胞糖酵解的调控作用及对氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)细胞凋亡的影响。方法 基于大鼠星形胶质细胞构建OGD/R细胞模型，加入100μmol/L HIF-1α激动剂(DMOG)作用不同时间，CCK8检测细胞增殖活性，实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中HIF-1α mRNA表达，试剂盒检测葡萄糖和乳酸含量。将细胞分成Control组、OGD/R组、OGD/R+DMOG组、OGD/R+糖酵解抑制剂(2-DG)组、OGD/R+2-DG+DMOG组。CCK8法检测各组细胞增殖变化，流式检测细胞凋亡，qRT-PCR检测HIF-1α mRNA表达，Western印迹检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、己糖激酶(HK)2和丙酮酸激酶(PK)M2蛋白表达，试剂盒检测三磷酸腺苷(ATP)、葡萄糖及乳酸含量。结果 DMOG处理OGD/R细胞12 h后，细胞增殖活性下降最显著，HIF-1α mRNA表达明显上调，葡萄糖含量明显降低，乳酸含量明显上升(P<0.05)。与Control组相比，OGD/R组细胞增殖活力下降，凋亡率上升，Caspase-3蛋白表达上调，HIF-1α mRNA表达下调，GLUT1、HK2、PKM2蛋白表达下调，ATP及乳酸含量下降，葡萄糖含量上升，差异显著(P<0.05)。与OGD/R组相比，OGD/R+DMOG组细胞增殖活力上升，凋亡率下降，Caspase-3蛋白表达下调，HIF-1α mRNA表达上调，GLUT1、HK2、PKM2蛋白表达上调，葡萄糖含量明显降低，ATP和乳酸含量明显上升(P<0.05),而OGD/R+2-DG组趋势明显相反(P<0.05)。与OGD/R+2-DG组相比，OGD/R+2-DG+DMOG组上述指标变化趋势明显逆转(P<0.05)。结论 HIF-1α激活通过改善糖酵解抑制OGD/R诱导的星形胶质细胞的凋亡。
关键词：星形胶质细胞;;氧糖剥夺/复氧复糖;;缺氧诱导因子1α;;糖酵解;;细胞凋亡
