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作者：刘双双;朱正帅;杨子林;段东奎;符克优;沈索姣;
单位：南阳市中心医院;
摘要：目的 探讨长链非编码(Lnc)RNA位于染色体8p12上的抑癌基因LncRNA(TSLNC8)靶向微小RNA(miR)-205-5p对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响和分子机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测正常肺上皮细胞和3种肺癌细胞中LncRNA TSLNC8和miR-205-5p表达。以A549细胞为研究对象，分别构建过表达LncRNA TSLNC8或抑制miR-205-5p表达的细胞株。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活力；流式细胞术检测细胞凋亡；Western印迹检测Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)、剪切型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved caspase)-3、磷酸化(p)-磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和p-蛋白激酶B(AKT)表达水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证LncRNA TSLNC8和miR-205-5p的靶向调控关系。结果 与正常肺上皮细胞比较，肺癌细胞H1299、A549和H4463中LncRNA TSLNC8表达明显较低，而miR-205-5p表达明显较高(P<0.05)。与pcDNA-con组或anti-miR-con组比较，pcDNA-LncRNA TSLNC8组或anti-miR-205-5p组A549细胞存活率、Ki-67和PCNA蛋白水平明显降低，而细胞凋亡和Cleaved caspase-3蛋白水平明显升高(P<0.05)。miR-205-5p是LncRNA TSLNC8的靶基因，且LncRNA TSLNC8负性调控miR-205-5p表达。与pcDNA-LncRNA TSLNC8+miR-con组比较，pcDNA-LncRNA TSLNC8+miR-205-5p组miR-205-5p表达、A549细胞存活率、Ki-67和PCNA蛋白水平明显升高，而细胞凋亡和Cleaved caspase-3蛋白水平明显降低(P<0.05)。与pcDNA-con组或anti-miR-con组比较，pcDNA-LncRNA TSLNC8组或anti-miR-205-5p组A549细胞中p-PI3K和p-AKT蛋白水平明显降低(P<0.05)。与pcDNA-LncRNA TSLNC8+miR-con组比较，pcDNA-LncRNA TSLNC8+miR-205-5p组p-PI3K和p-AKT蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论 LncRNA TSLNC8通过靶向miR-205-5p抑制AKT信号通路进而抑制非小细胞肺癌细胞增殖，促进细胞凋亡。
关键词：长链非编码(Lnc)RNA TSLNC8;;微小RNA(miR)-205-5p;;非小细胞肺癌;;细胞增殖;;凋亡;;蛋白激酶B(AKT)信号通路
基金资助：河南省医学科技攻关计划(联合共建)项目(LHGJ202216158)
