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中国老年学杂志2025年第19期:miR-519d-3p靶向FoxF1对结直肠癌HCT116细胞活力、侵袭能力的影响

来源:期刊VIP网 时间:


作者:霍浩然;张蓓;薛佳栋;秦瑞峰;尹立阳;袁增江;

单位:邯郸市中心医院普外三科;

摘要:目的 探讨微小RNA(miR)-519d-3p靶向叉头盒转录基因(Fox)F1对结直肠癌HCT116细胞活力、侵袭能力的影响。方法 采集35例结直肠癌患者癌组织及邻近正常组织(癌旁组织)。同时体外培养人结直肠癌细胞HCT116,将培养至对数生长期的HCT116细胞分为对照组(常规培养HCT116细胞)、miR-NC组(HCT116细胞转染miR-519d-3p空载质粒)、miR-519d-3p组[HCT116细胞转染miR-519d-3p模拟物(mimics)质粒]、miR-519d-3p+FoxF1-NC组(HCT116细胞转染miR-519d-3p mimics质粒和FoxF1空载质粒)、miR-519d-3p+FoxF1组(HCT116细胞转染miR-519d-3p mimics质粒和FoxF1过表达质粒)。实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测结直肠癌组织和癌旁组织及各组HCT116细胞miR-519d-3p、FoxF1 mRNA表达;细胞计数试剂盒-8法检测各组HCT116细胞活力;Transwell法检测各组细胞侵袭能力;集落形成实验检测各组细胞集落形成能力;双荧光素酶报告基因验证miR-519d-3p与FoxF1靶向调控关系;Western印迹法检测各组HCT116细胞中FoxF1、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p53、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果 与癌旁组织相比,结直肠癌组织miR-519d-3p表达显著降低,FoxF1 mRNA表达显著升高(P<0.05);与对照组和miR-NC组相比,miR-519d-3p组和miR-519d-3p+FoxF1-NC组细胞中miR-519d-3p表达、p53蛋白表达显著升高,FoxF1 mRNA和蛋白表达、细胞活力、侵袭数目、集落形成数量、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(均P<0.05);与miR-519d-3p组和miR-519d-3p+FoxF1-NC组相比,miR-519d-3p+FoxF1组细胞中miR-519d-3p表达差异无统计学意义(P>0.05),FoxF1 mRNA和蛋白、细胞活力、侵袭数目、集落形成数量、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著升高,p53蛋白表达显著降低(均P<0.05);miR-519d-3p可靶向调控FoxF1。结论 miR-519d-3p可靶向下调FoxF1抑制结直肠癌HCT116细胞活力、侵袭能力。

关键词:微小RNA-519d-3p;;叉头盒转录基因F1;;结直肠癌;;细胞活力;;侵袭能力

基金资助:河北省医学科学研究课题计划项目(20220556)