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作者:梅凡;涂艳虹;
单位:江汉大学附属医院武汉市第六医院综合科;江汉大学附属医院武汉市第六医院中西医结合科;
摘要:目的 探讨桃叶珊瑚苷(AU)调节沉默信息调节因子(SIRT)1/AMP依赖蛋白激酶(AMPK)信号通路对结肠癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响。方法 以结肠癌细胞系HCT116细胞为研究对象,噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度AU对细胞活力的影响;将生长良好的HCT116细胞分为AU组(60μmol/L AU)、白藜芦醇组(20μmol/L白藜芦醇)、SIRT1抑制剂(EX527)组(20μmol/L EX527)、AU+白藜芦醇组(60μmol/L AU+20μmol/L白藜芦醇)、AU+EX527组(60μmol/L AU+20μmol/L EX527),并以未经处理的细胞为空白组,分别检测各组细胞活力、凋亡、自噬小体、自噬蛋白微管相关蛋白1轻链(LC)3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin)-1、增殖蛋白细胞周期蛋白(Cyclin)D1、凋亡蛋白B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、p-AMPK、SIRT1、AMPK蛋白表达。结果 随着AU浓度增加,HCT116细胞活力逐渐降低,60μmol/L AU活力接近50%,先为后续研究浓度。与空白组相比,AU组、白藜芦醇组细胞结构被破坏,凋亡率、自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达显著增加,细胞活力、CyclinD1、Bcl2蛋白表达显著降低(P<0.05),但EX527组细胞数量显著增多,凋亡率、自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达显著降低,细胞活力、CyclinD1、Bcl2蛋白表达显著增加(P<0.05);与AU组、白藜芦醇组相比,AU+白藜芦醇组数量降低,凋亡率、自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达显著增加,细胞活力、CyclinD1、Bcl2蛋白表达显著降低(P<0.05);与AU组相比,AU+EX527组凋亡率、自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达显著降低,细胞活力、CyclinD1、Bcl2蛋白表达显著增加(P<0.05);与EX527组相比,AU+EX527组凋亡率、自噬小体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白表达显著增加,细胞活力、CyclinD1、Bcl2蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 AU通过激活SIRT1/AMPK信号通路抑制结肠癌细胞增殖,促进细胞凋亡和自噬。
关键词:桃叶珊瑚苷;;沉默信息调节因子(SIRT)1/AMP依赖蛋白激酶(AMPK)信号通路;;结肠癌;;增殖;;凋亡和自噬