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作者:张武香;李永川;冯海霞;艾小庆;
单位:青海红十字医院妇科;
摘要:目的 研究芦荟大黄素对卵巢癌CAOV3细胞恶性行为的影响及作用机制。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)确定circ_0008673和miR-502-5p在卵巢癌组织中的表达情况,并探讨二者表达水平与卵巢癌患者临床病理特征的相关性。Pearson相关系数确定卵巢癌组织中circ_0008673和miR-502-5p表达的相关性。将CAOV3细胞分为对照组(正常培养,不做处理)、芦荟大黄素7.5、15.0和30.0μmol/L组(分别用含终浓度为7.5、15.0、30.0μmol/L的芦荟大黄素培养液孵育CAOV3细胞24 h)、si-NC组(转染si-NC的CAOV3细胞)、si-circ_0008673组(转染si-circ_0008673的CAOV3细胞)、芦荟大黄素+pc-NC组(转染pcDNA后,用含30μmol/L终浓度的芦荟大黄素培养液处理CAOV3细胞24 h)和芦荟大黄素+pc-circ_0008673组(转染pcDNA-circ_0008673后,用含30μmol/L终浓度的芦荟大黄素培养液处理CAOV3细胞24 h)。双荧光素酶报告实验分析circ_0008673和miR-502-5p的相互作用,CCK-8法、流式细胞术、克隆形成实验、Transwell实验用于检测CAOV3细胞增殖抑制率、凋亡率、克隆数和迁移数;Western印迹检测细胞活化的胱天蛋白酶(Cleaved-caspase)-3、caspase-3、E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin蛋白表达。结果 卵巢癌组织中circ_0008673呈高表达,miR-502-5p呈低表达,二者表达呈明显负相关,且二者表达与国际妇产科联盟(FIGO)分期、肿瘤直径明显相关(均P<0.05)。circ_0008673靶向负调控miR-502-5p表达。与对照组比较,芦荟大黄素7.5、15.0、30.0μmol/L组CAOV3细胞抑制率、凋亡率、miR-502-5p表达量、Cleaved-caspase-3/caspase-3表达和E-cadherin蛋白表达显著升高,细胞克隆数、迁移数、circ_0008673表达量和N-cadherin蛋白表达显著降低(P<0.05)。相较于si-NC组,si-circ_0008673组细胞凋亡率、细胞抑制率、miR-502-5p水平、Cleaved-caspase-3/caspase-3表达和E-cadherin蛋白表达明显上升,细胞迁移数、克隆数和N-cadherin蛋白表达明显下降(P<0.05)。相较于芦荟大黄素+pc-NC组,芦荟大黄素+pc-circ_0008673组细胞凋亡率、细胞抑制率、Cleaved-caspase-3/caspase-3表达和E-cadherin蛋白表达明显下降,细胞迁移数、克隆数和N-cadherin蛋白表达明显上升(P<0.05)。结论 芦荟大黄素可能通过下调circ_0008673,上调miR-502-5p表达,抑制卵巢癌CAOV3细胞增殖和迁移并诱导细胞凋亡。
关键词:卵巢癌;;芦荟大黄素;;circ_0008673;;miR-502-5p;;增殖;;迁移;;凋亡