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作者：梁殿迅;李和丽;朱军义;许静;郭哲;孙慧霞;吕红珂;
单位：南阳市中心医院;
摘要：目的 探讨长链非编码(Lnc)RNA H19通过靶向调节miR-140-5p/高迁移率族蛋白(HMG)B1轴对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测宫颈癌组织和细胞系CaSki、HeLa、Siha、C-33A中H19、miR-140-5p和HMGB1 mRNA表达水平。采用脂质体2000转染试剂对CaSki细胞进行转染并随机分为Con组、si-NC组、si-H19组、mimics NC组、miR-140-5p mimics组、inhibitor NC组、miR-140-5p inhibitor组、si-H19+inhibitor NC组、si-H19+miR-140-5p inhibitor组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CaSki细胞增殖；流式细胞术测定细胞凋亡；Transwell小室测定迁移、侵袭；双荧光素酶报告实验证实H19与miR-140-5p的靶向关系；Western印迹检测CaSki细胞中HMGB1蛋白表达水平。结果 与癌旁组织或人宫颈永生化鳞状细胞Ect1/E6E7相比，H19和HMGB1 mRNA在宫颈癌组织和细胞系中的表达显著上升，miR-140-5p表达显著下降(P<0.05)。选取H19表达量最高的CaSki细胞进行转染实验。敲低H19或过表达miR-140-5p均可使CaSki细胞光密度(OD)值(24、48、72 h)减小，凋亡率升高，迁移、侵袭细胞数减少，差异显著(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实H19与miR-140-5p存在靶向负调控关系。与si-H19组比较，si-H19+miR-140-5p inhibitor组OD值(24、48、72 h)增加，凋亡率下降，迁移、侵袭细胞数增多，差异显著(P<0.05)。此外，敲低H19表达后HMGB1 mRNA和蛋白表达明显降低，而抑制miR-140-5p可明显逆转敲低H19对HMGB1 mRNA和蛋白表达的影响(P<0.05)。结论 敲低H19可通过上调miR-140-5p表达，下调HMGB1表达，抑制宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭，促进凋亡。
关键词：长链非编码RNA H19;;miR-140-5p;;高迁移率族蛋白B1;;宫颈癌;;增殖;;凋亡;;迁移;;侵袭
基金资助：河南省医学科技攻关项目(182300420285)
