来源：期刊VIP网 时间：
作者：张金丽;苏春芝;苏飞;朱晓迪;
单位：河北省中医院肝病科;
摘要：目的 探究白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活蛋白(STAT)3信号通路通过调控辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)细胞免疫失衡对小鼠肝纤维化进程的影响及分子机制。方法 选取BALB/C雄性小鼠40只，腹腔注射2%四氯化碳(CCl_4)油溶液构建小鼠纤维化模型，腹腔注射IL-6/STAT3信号通路抑制剂(AG490)进行干预，构建Sham组、模型(Model)组、低、高剂量AG490(L-AG490、H-AG490)组；模型建立5 w后取小鼠眼球血后处死，获取肝脏组织；流式细胞仪检测肝脏组织悬浮液中Th17、Treg细胞占比；苏木素-伊红(HE)及Masson染色分析肝脏纤维化程度；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肝功能因子[天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(Tbil)、白蛋白(ALB)]、相关因子IL-17A、IL-6、IL-10、转化生长因子(TGF)-β1水平；免疫组化染色分析肝脏组织内Th17/Treg细胞免疫关键蛋白维甲酸相关孤儿受体(ROR)-γt、叉头框蛋白(Fox)p3阳性表达；Western印迹检测肝脏组织内肝纤维化蛋白α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)及STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果 与Sham组相比，Model组肝脏组织内IL-6、p-STAT3 mRNA表达明显上调(P<0.05);与Model组相比，AG490干预可以明显降低IL-6、p-STAT3 mRNA表达，且H-AG490组明显低于L-AG490组(P<0.05)。与Sham组相比，模型组肝组织内Th17、Treg、Th17/Treg、细胞分泌因子(IL-17A、IL-6、IL-10、TGF-β1)水平、关键蛋白(ROR-γt、Foxp3)阳性表达均明显上调(P<0.05);与Model组相比，AG490干预后，上述指标均明显下调，且H-AG490组明显低于L-AG490组(P<0.05)。与Sham组相比，Model组肝损伤因子(AST、ALT、Tbil)、炎性细胞浸润、水肿、空泡样变性及肝细胞体积增大趋势、Markin改良炎症组织学评分及纤维化蛋白(α-SMA、Col-Ⅳ、PⅢNP)表达均明显升高，ALB水平明显降低(P<0.05);与Model组相比，AG490干预后，上述指标变化均有统计学差异，且H-AG490组与L-AG490组各指标差异显著(P<0.05)。结论 抑制IL-6/STAT3信号通路活性可减轻肝纤维化小鼠肝脏损伤及炎症程度，其抗纤维化的分子机制可能与抑制Th17/Treg细胞免疫失衡反应相关。
关键词：肝纤维化;;白细胞介素(IL)-6/信号转导子转录激活蛋白(STAT)3信号通路;;辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)细胞免疫反应;;炎症
基金资助：河北省重点研发计划项目(223777124D)
