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作者:郑玲;姜海波;李梦茹;周波;
单位:湖北医药学院附属随州医院(随州市中心医院);
摘要:目的 探讨水苏碱(STA)调节Hippo/Yes相关蛋白(YAP)信号通路对高糖诱导的视网膜血管内皮细胞(HRECs)损伤的影响。方法 使用0~64μmol/L的STA处理HRECs,筛选STA最佳浓度,将HRECs分为对照(C)组、高糖诱导(M)组、STA低浓度(STA L)组、STA高浓度(STA H)组、STA+Hippo/YAP抑制剂(VP)组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞迁移;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平;二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测活性氧(ROS)水平;Western印迹法检测磷酸化(p)-哺乳动物STE20样蛋白激酶(MST)1、MST1、p-YAP、YAP、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(c-caspase)-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白表达。结果 与C组比较,M组细胞凋亡率、MDA、ROS水平及c-caspase-3、p-MST1/MST1蛋白表达明显增加,细胞存活率、迁移细胞数、SOD水平及Bcl-2、p-YAP/YAP蛋白表达明显减少(P<0.05);与M组比较,STA L、STA H组细胞凋亡率、MDA、ROS水平及c-caspase-3、p-MST1/MST1蛋白表达逐渐明显减少,细胞存活率、迁移细胞数、SOD水平及Bcl-2、p-YAP/YAP蛋白表达逐渐明显升高(P<0.05);与STA H组比较,STA+VP组细胞凋亡率、MDA、ROS水平及c-caspase-3、p-MST1/MST1蛋白表达明显升高,细胞存活率、迁移细胞数、SOD水平及Bcl-2、p-YAP/YAP蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 STA可能通过调节Hippo/YAP信号通路减少对高糖诱导的HRECs细胞的损伤。
关键词:水苏碱;;糖尿病视网膜病变;;Hippo/Yes相关蛋白(YAP)信号通路;;高糖诱导;;视网膜血管内皮细胞