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作者：王丹;耿丽晶;黄薇;付航;刘晓宇;MuhammadZain Ul Aabideen;MbingaIsequias Elamba Tertulliano;周围;
单位：锦州医科大学食品与健康学院;辽宁省肉类加工与质量安全控制专业技术创新中心;锦州医科大学分子细胞生物学与新药重点实验室;
摘要：目的]对稳定性较差的菠萝蛋白酶（Bromelain）进行固定化技术改良，提高其利用率、稳定性和贮藏性。[方法]通过响应面法优化磁性壳聚糖/海藻酸钠固定菠萝蛋白酶（Fe_3O_4-SA/CS-Br）的最佳制备工艺。对Fe_3O_4-SA/CS-Br进行表征并测定其K_m值、操作稳定性、热稳定性、贮藏稳定性及应用效果。[结果]Fe_3O_4-SA/CS-Br的最佳制备条件为m_(壳聚糖)∶m_(海藻酸钠)为1∶4,Fe_3O_4质量浓度为10 mg/mL,CaCl_2质量浓度为32 mg/mL，固定时间为106 min,pH为7.0，酶质量浓度为1.0 mg/mL。扫描电镜、红外光谱及X衍射光谱结果表明，Bromelain的主要基团被成功固定至Fe_3O_4-壳聚糖/海藻酸钠（Fe_3O_4-SA/CS）微球上。经固定化处理后的Bromelain与底物的亲和性增强，提高了稳定性和应用效果。[结论]Fe_3O_4-SA/CS-Br可有效增强Bromelain的稳定性。
关键词：磁性微球;;壳聚糖;;海藻酸钠;;固定化;;菠萝蛋白酶;;酶学性质
基金资助：辽宁省应用基础研究计划（编号：2023JH2/101300172）;; 锦州医科大学大学生创新创业项目（编号：X202410160009X）;; 辽宁省省级大学生创新创业项目（编号：S202310160003X）
