来源:期刊VIP网 时间:
作者:肖珍艳;伍强;王晓玲;黄佳;王浩锦;刘高强;
单位:中南林业科技大学林业生物技术湖南省重点实验室;中南林业科技大学森林资源生物技术湖南省国际科技创新合作基地;邵阳学院生态酿酒技术与应用湖南省重点实验室;
摘要:[目的]探究从紫芝发酵菌丝体中鉴定出的具有抑制血管紧张素转化酶的活性肽Asp-Leu-Ala-Pro(DLAP)的关键非核糖体肽合成酶(non-ribosomal peptide synthetase,NRPS)基因。[方法]采用PEG介导遗传转化试验,qRT-PCR和HPLC分析关键NRPS基因对紫芝合成活性肽DLAP的影响。[结果]qRT-PCR分析阳性转化子菌株内的基因表达量显示,与野生型相比较,基因GSI_00900的3个沉默转化子的基因表达量分别下调了44.99%,68.88%,66.17%,基因GSI_10299的3个沉默转化子的基因表达量分别下调了74.11%,78.01%,75.76%,基因GSI_10830的2个沉默转化子的基因表达量分别下调了30.55%和76.99%,基因GSI_11441的8个沉默转化子的基因表达量下调范围为19.43%~84.80%;HPLC对阳性转化子的表型进行初探,发现筛选到的每个阳性转化子内DLAP的含量均比野生型低(P<0.05)。[结论]GSI_00900、GSI_10299、GSI_10830、GSI_11441 4种NRPS基因是合成活性肽DLAP的关键基因。
关键词:紫芝;;基因沉默;;活性肽;;非核糖体肽合成酶
基金资助:国家自然科学基金青年项目(编号:32202573);; 湖南省自然科学基金项目(编号:2025JJ60140);; 中南林业科技大学研究生创新项目(编号:2024CX02071)