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作者：余杰;麦热哈巴·玉素甫;王金华;王永泽;高娃;赵筱;
单位：湖北工业大学生命科学与健康工程学院;湖北工业大学发酵工程教育部重点实验室;湖北工业大学工业发酵省部共建协同创新中心;
摘要：L-乳酸的同分异构体D-乳酸会引起代谢性酸中毒、肠道屏障受损或其他未知的危害，因此需要减少用作食品酸味剂的L-乳酸中的D-乳酸含量。该研究通过加入硝酸钠以加强大肠杆菌L-乳酸工程菌在厌氧条件下对外源D-乳酸的消除；同时敲除L-乳酸脱氢酶基因(lldD基因、ykgEFG基因)以降低其对L-乳酸的消耗。摇瓶发酵实验证明，敲除L-乳酸脱氢酶基因的工程菌HBUT-LB,在添加20 mmol/L硝酸钠后，可有效清除1 g/L的外源性D-乳酸。在7 L发酵罐中利用含有D-乳酸的廉价原料进行发酵，添加20 mmol/L硝酸钠相对于未添加硝酸钠，工程菌HBUT-LB的D-乳酸消耗速率提高460%,L-乳酸的光学纯度从99.32%提升到99.99%。同时，最终发酵液中无硝酸钠与亚硝酸钠残留。结果表明，大肠杆菌工程菌HBUT-LB在发酵过程中，通过添加硝酸钠，可有效消除外源D-乳酸，提高L-乳酸的光学纯度，具有精制超高光学纯度L-乳酸的工业应用价值。
关键词：L-乳酸的光学纯度;;L-乳酸脱氢酶基因;;硝酸钠
基金资助：国家自然科学基金青年项目(31501677);; 教育部工业发酵省部共建协同创新中心2023年开放基金(4303-00149);; 企业合作项目(2022101(1))
