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作者:李恩静;王丹;李龙;李赫婧;杨红莲;
单位:北京市食品检验研究院(北京市食品安全监控和风险评估中心);国家市场监管重点实验室(食品安全重大综合保障关键技术);
摘要:[目的]建立微滴数字PCR技术检测致敏原芒果成分的方法。[方法]选取叶绿体trnH-psbA基因作为致敏原芒果成分检测的靶基因,设计特异性引物探针,对微滴数字PCR方法反应条件进行优化,对方法的灵敏度和稳定性进行验证,并应用于10批次食品样品中致敏原芒果成分检测。[结果]试验建立的微滴PCR方法特异性较好,不与芒果以外10种其他水果交叉反应,在上、下游引物和探针浓度分别为200,200,100 nmol/L,退火温度为52℃的最适微滴PCR反应条件下,方法的核酸水平检测灵敏度为5 pg/μL,芒果质量含量检测灵敏度为5 mg/kg,方法变异系数<25%,重复性好,应用于10批次食品样品检测结果与食品标签一致。[结论]该方法具有快速、特异性、灵敏度高的优点,适用于致敏原芒果成分的检测。
关键词:微滴数字PCR;;芒果;;致敏原检测
基金资助:国家重点研发计划项目(编号:2019YFC1605001)