来源：期刊VIP网 时间：
作者：梁颖;刘睿;宋超东;谢俊杰;殷豆豆;许霞;杨登峰;张红岩;申乃坤;
单位：广西民族大学海洋与生物技术学院,广西多糖材料与改性重点实验室;广西科学院,广西北部湾海洋研究中心,广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室;
摘要：为了筛选出高产壳聚糖酶的菌株，并对其最优产酶条件及酶学性质进行研究。本研究从广西北海养殖虾塘底泥采样，经初筛、复筛选出高产壳聚糖酶菌株，并进行鉴定，再通过单因素实验、Plackett-Burman及正交试验优化产酶工艺，最后对其酶学性质及产物进行研究。结果表明，筛选到1株高产壳聚糖酶的菌株Gxun-5.3.3，鉴定为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）；菌株Gxun-5.3.3产酶的最优工艺为：麦芽糖5 g/L、酵母粉3 g/L、壳聚糖15 g/L、初始pH6.0、发酵时间84 h，优化后酶活可达62.03±1.18 U/mL，较优化前（39.87±1.24 U/mL）提高了55.58%；酶学性质研究表明，该酶最适反应温度为60℃，最适反应pH为5.0，金属离子中Fe~(2+)、Mn~(2+)对壳聚糖酶有显著（P<0.05）的激活作用，而Al~(3+)、Cu~(2+)则有较强的抑制作用；酶解壳聚糖产物经薄层层析（Thin Layer Chromatography,TLC）测定为聚合度2～4的壳寡糖，表明菌株所产壳寡糖酶为内切型。本研究为B. cereus Gxun-5.3.3壳聚糖酶的生产和壳寡糖的酶法制备提供了理论依据。
关键词：壳聚糖酶;;蜡样芽孢杆菌;;条件优化;;酶学性质;;壳寡糖
基金资助：广西科技重点研发计划项目（桂科AB21196019,桂科AB21220020）;; 国家自然科学基金项目（31660022,32060020）;; 大学生创新创业训练计划项目（202110608014,S202210608164,S202210608156）;; 广西民族大学实验技术创新与实验室管理研究项目（2023MDSY002）;; 广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室开放基金资助
