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作者：任汐月;郑传洋;陈海银;胡勇;
单位：湖北工业大学生命科学与健康工程学院,湖北省食品发酵工程技术研究中心;
摘要：运用原生质体融合技术对醋酸发酵工业菌株巴氏醋酸杆菌(Acetobacter pasteurianus, A.pasteurianus)定向改造，提高醋酸菌乙醇、乙酸耐受能力及产酸量。通过探究高渗溶液成分、酶解时间、酶解液浓度及酶解温度4个因素，确定醋酸菌原生质体制备及再生的最适条件；使用原生质体融合技术对乙酸耐受较强的工业菌株A. pasteurianus 1.41及乙醇耐受较强的野生株A.pasteurianus 503进行原生质体融合，并研究融合子的乙酸乙醇耐受性、产乙酸能力和遗传稳定性。结果表明，使用10%蔗糖、0.5 mol/L乙二胺四乙酸、0.1 mol/L Tris-HCl作为高渗溶液，在酶解时间40 min、酶解温度为37℃、溶菌酶浓度为50μg/m L条件下，原生质体制备率及再生率达到最优，分别为98.50%～99.12%和40.51%～42.70%。融合菌株RH-7耐受13%乙醇和1.5%乙酸，优于A.pasteurianus 1.41和A.pasteurianus 503的耐受性。在含10%乙醇的发酵培养基中，产酸量达45.78g/L；遗传稳定实验表明，菌株RH-7生长及产酸量稳定性较好。该研究提供A. pasteurianus原生质体制备的最适条件，使用原生质体融合技术筛选出一株具有良好发酵性能的菌株RH-7，为优化醋酸菌发酵工业应用提供参考。
关键词：巴氏醋酸杆菌;;原生质体融合;;乙酸耐受;;乙醇耐受
基金资助：湖北省粮食局流通产业发展项目(鄂粮发[2020]14号)
