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作者:祖未希;雷一凡;韩宇航;李晨;
单位:太原旅游职业学院;山西大学生命科学学院;
摘要:通过硫酸铵沉淀、透析、DEAE(Diethylaminoethyl)阴离子交换层析、Superdex G-75凝胶柱纯化得到槐米凝集素(Flos sophorae immaturus lectin, FSIL),进一步研究其凝集素活性、糖苷键类型、糖结合特异性、热稳定性及体外消化特性等。结果表明:FSIL的相对分子质量为62.3 ku,高碘酸希夫染色显示该凝集素为糖蛋白;经PNGase F酶解法及β-消除反应鉴定得到FSIL的糖苷键为O-型糖苷键。FSIL对A、B、O型血均有凝血活性,为半乳糖型凝集素。沸水处理30 min后,FSIL凝血活性丧失,圆二色光谱及紫外吸收光谱结果显示加热处理后FSIL的二级结构更加伸展,疏水性氨基酸残基暴露。体外模拟消化实验表明,FSIL耐受模拟胃液的消化,作用60 min时多肽链未发生降解,对模拟肠液的消化也有一定抗性,完全降解需40 min;但经沸水处理30 min后,FSIL的抗蛋白酶消化性极大降低,仅需10 min便可被模拟胃液和模拟肠液完全降解。该研究为槐米制品的安全开发及FSIL的应用奠定了一定理论基础。
关键词:槐米;;凝集素;;纯化;;糖蛋白;;稳定性
基金资助:山西省自然科学基金项目(202203021221015);; 山西大学杏花村学院开放课题基金项目(XCSXU-KF-202325);; 山西省研究生教育创新项目(2023KY143,2023SJ029)