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作者：于静;段子朋;徐松涛;
单位：漯河医学高等专科学校;
摘要：目的：分析灰树花多糖（Grifola frondose polysaccharide,GFP）对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法：将对数期GBC-SD细胞随机分组：对照组、GFP组（0.5、1、2μg/mL GFP）、shNC组、shHULC组、miR-NC组、miR-186-5p mimics组、GFP+pcDNA组、GFP+pcDNA-HULC组。CCK-8法检测细胞抑制率；Transwell小室法检测GBC-SD细胞迁移和侵袭；Western Blot印迹检测Cyclin D1、P21、MMP-2、MM-9蛋白水平；qRT-PCR检测LncRNA HULC和miR-186-5p的水平；Starbase在线软件预测HULC与miR-186-5p的结合位点，双荧光素酶报告实验检测LncRNA HULC和miR-186-5p的靶向关系。裸鼠移植瘤实验检测GFP对GBC-SD细胞移植瘤体内生长的影响。结果：0.25～8μg/mL GFP对胆囊癌GBC-SD细胞具有一定的抑制作用；与对照组比较，0.5、1、2μg/mL的GFP（极）显著（P<0.05,P<0.01）抑制GBC-SD细胞迁移和侵袭，（极）显著降低Cyclin D1、MMP-2和MM-9水平（P<0.05,P<0.01），（极）显著（P<0.05,P<0.01）增加P21水平，极显著（P<0.01）下调LncRNAHULC，上调miR-186-5p的表达（P<0.05, P<0.01）; Starbase在线软件预测HULC与miR-186-5p存在结合位点，与miR-NC组比较，miR-186-5p mimics组HULC-WT的荧光素酶活性极显著降低（P<0.01），而HULC-MUT荧光素酶活性无统计学差异（P>0.05）；与shNC组比较，shHULC组HULC相对表达水平极显著（P<0.01）降低，miR-186-5p相对表达水平极显著（P<0.01）增加，细胞存活率、迁移数目、侵袭数目极显著（P<0.01）降低，Cylin D1、MMP-2和MM-9水平极显著下调（P<0.01）；与GFP+pcDNA组比较，GFP+pcDN-HULC组抑制率显著降低（P<0.05），迁移数目、侵袭数目极显著增加（P<0.01）,Cylin D1、MMP-2和MM-9水平显著上调（P<0.05）；与GFP+pcDNA给药组比较，GFP+pcDN-HULC给药组瘤体体积、质量极显著增加（P<0.01）,miR-186-5p水平极显著下调（P<0.01）。结论：GFP可抑制胆囊癌细胞的增殖、侵袭和迁移，其机制与调控LncRNA HULC/miR-186-5p有关。
关键词：灰树花多糖;;LncRNA HULC;;miR-186-5p;;胆囊癌;;增殖;;迁移;;侵袭
基金资助：河南省二0二二年科技发展计划（222102310443）;; 漯河医学高等专科学校2023年度科技创新项目（2023ZD04）
