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作者:连战;李天罡;王松江;郭传庄;李胜涛;吕志飞;李升梅;王建彬;
单位:东晓生物科技股份有限公司;
摘要:为实现产精氨酸脱亚氨基酶大肠杆菌全细胞催化合成L-瓜氨酸的工业化生产,对其催化工艺进行研究。首先探讨菌体处理方式,确定不同贮存时间较适处理方式如下:<24 h,常温处理;24~36 h,冷冻处理;>36 h,冷藏处理。在上述处理方式的基础上,采取单因素法分别探究全细胞催化产L-瓜氨酸的转化p H值、温度、底物浓度、酶加量、金属离子、转化周期,并对胞内胞外酶转化的占比、全细胞酶二次转化效果进行研究。结果显示,较适催化条件为pH5.5、温度40℃、底物浓度150 g/L、加酶量2 g/L,添加10 mmol/L Mg~(2+)、0.1 mmol/L Co~(2+),周期24 h,在该工艺条件下使用10 L反应釜进行小试转化,转化率可达99.21%,较初始条件提升了5.07%,同时转化周期缩短8 h,该工艺的确定为精氨酸脱亚氨基酶全细胞催化产L-瓜氨酸的工业化应用奠定了基础。
关键词:L-瓜氨酸;;全细胞催化;;精氨酸脱亚氨基酶;;转化率
基金资助:国家重点研发计划项目(2023YFD1300700)