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作者:郦娟;陈琼;刘萍;褚冲;戴小芳;辛博;高家昊;杨永;
单位:武汉食品化妆品检验所,国家市场监管重点实验室(食用油质量与安全);
摘要:传统微生物方法以及实时荧光聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR)方法都不能完全满足重大活动食品安全保障工作中现场检测的要求,因此研究将重组酶聚合酶等温扩增(Recombinant polymerase isothermal amplification, RPA)与侧向流免疫试纸(Lateral flow immunoassay,LFS)技术结合用于检测单增李斯特氏菌。RPA-LFS方法在纯菌、人工污染熟肉制品和新鲜水果中的检出限分别为3.0×101、3.0×10~1 CFU/g和3.0×10~2 CFU/g。结合叠氮溴化丙啶(Propidium monoazide,PMA)处理,建立了检测活菌的PMA-RPA-LFS检测方法,该方法可以抑制104 CFU/mL浓度水平的死菌的扩增。将2种方法和GB 4789.10—2016用于人工污染和实际样品的检测,结果发现PMARPA-LFS可减少死菌带来的假阳性。建立的方法分别适用于未经或经热处理的食品。该研究为不同类型食品提供不同的检测方法选择,同时为重大活动食品安全保障工作中致病菌的检测提供了新思路。
关键词:单增李斯特氏菌;;叠氮溴化丙锭;;侧向流免疫;;重组酶聚合酶等温扩增
基金资助:国家市场监督管理总局科技项目(2020MK131);; 湖北省市场监督管理局技术保障和科技计划项目(Hbscjg-JS2021007)