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作者：董欣;隋欣彤;胡力铭;王仁广;李占国;王景龙;王淑敏;梁磊;
单位：长春中医药大学药学院;吉林省中科生物工程股份有限公司;吉林省蒲川生物医药有限公司;
摘要：优选米汤制天麻的炮制工艺，并考察其对脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）诱导的小胶质细胞（BV-2）炎症反应的作用。采用高效液相色谱法检测天麻提取物中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷A的含量，以六种成分含量为评价指标，以米汤与水体积比、煮制时间、干燥温度为单因素变量，在单因素的基础上，通过三个指标综合考虑，设计正交试验，优化米汤制天麻的制备工艺，并比较6种成分在不同炮制品中的含量。脂多糖诱导的神经炎症细胞模型，CCK-8法测定天麻炮制品提取物对BV2细胞存活率的影响；ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β的释放水平；Western blot法检测TLR4、MYD88、P65、INOS、COX-2、IL-1β蛋白的表达变化。结果表明，煮制时间和米汤与水体积比对试验结果有显著（P<0.05）影响，米汤制天麻的炮制工艺：米汤与水体积比为1:3，煮制25 min,75℃烘干。米汤制品中6种成分含量综合评分高于蒸制制品。天麻提取物对LPS诱导BV2细胞损伤具有不同程度的保护作用。与正常对照组比较，LPS组TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌显著上升（P <0.001），与LPS组，两种炮制品均可抑制TNF-α(P<0.05)、IL-1β(P<0.05,P<0.001)、IL-6(P<0.05,P<0.001)的释放。Western blot结果显示，与LPS组比较，两种炮制品可能显著抑制LPS诱导的TLR4/MYD88/NF-κB信号通路的激活，减少TLR4(P<0.01)、MYD88(P<0.01, P<0.05)、 P65(P<0.01)、 INOS(P<0.05)、 COX-2(P<0.05, P<0.001)、 IL-1β(P<0.001)蛋白的表达。优选的米汤制天麻工艺操作简便，稳定可行；天麻炮制品可能通过抑制TLR4/MYD88/NF-κB信号通路，而降低炎症因子的表达。
关键词：天麻;;米汤制;;正交试验法;;神经炎症
基金资助：吉林省科技发展计划项目（20210204198YY）
