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作者：蒲元浩;彭凯歌;刘晓宇;孟庆泳;赵芳坤;桑亚新;
单位：河北农业大学食品科技学院;
摘要：为研究葡聚糖在乳酸菌中的合成情况以及结构分析，本研究将葡聚糖蔗糖酶DsrB与带有SP45分泌信号肽的乳酸乳球菌表达载体pNZ8148质粒载体进行连接，电转入乳酸乳球菌NZ9000中进行异源表达。经由一系列醇沉、三氯乙酸去除蛋白质、二次醇沉、透析以及纯化等步骤得到多糖溶液。采用高效液相色谱法检测单糖组成；利用HPSEC测定葡聚糖的分子量；通过傅里叶红外技术、核磁共振技术以及扫描电镜分析多糖的结构并观察多糖表面特征。结果表明，将葡聚糖蔗糖酶在乳酸菌中进行表达，在蔗糖浓度为10%的条件下，葡聚糖产量为10.54 g/L；单糖组成显示仅含有葡萄糖一种单糖；胞外多糖分子量测定结果为2.4×10~6 Da；由傅里叶红外和核磁联合表明体外合成的胞外多糖仅含有α-(1,6)糖苷键；扫描电镜表示胞外多糖表面呈现为多孔状结构。在乳酸菌中异源表达，实现了葡聚糖的食品级生产，为葡聚糖于食品中应用提供了理论基础。
关键词：葡聚糖蔗糖酶;;葡聚糖;;胞外多糖;;食品级生产;;重组表达
基金资助：国家重点研发计划（2022YFD1600405）
