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作者：李鹏;刘兰;王通;黄筱萍;
单位：江西省科学院微生物研究所;
摘要：假肠膜明串珠菌HL64合成高光学纯度D-乳酸，然而，关键D-乳酸脱氢酶尚不明晰。本文旨在通过全基因组测序，鉴定关键D-乳酸脱氢酶及其酶学性质，为进一步改造假肠膜明串珠菌HL64合成D-乳酸提供理论依据。半定量PCR初步确定关键D-乳酸脱氢酶，克隆该基因，进行体外表达与纯化，深入研究相关酶学性质。结果表明LDH2(OYT93＿08575)编码关键D-乳酸脱氢酶，其最适pH和反应温度分别是pH8和30℃。LDH2对丙酮酸及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的K_m值分别为0.578 mmol/L及0.275 mmol/L，对丙酮酸的K_(cat)及K_(cat)/K_m值分别为45.04 s~(-1)及7.88×10~4 L/（mol·s），表明LDH2对丙酮酸具有较高催化效率。除了将丙酮酸作为底物以外，LDH2对草酰乙酸及苯丙酮酸也具备一定的催化能力。
关键词：假肠膜明串珠菌;;全基因组测序;;D-乳酸;;D-乳酸脱氢酶;;酶学性质;;酶动力学
基金资助：江西省科学院重点研发计划项目（2022YSBG22011,2021YSBG21014,2022YSBG21007）
