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作者：刘温凯;欧阳丹;徐仰丽;苏来金;
单位：温州大学生命与环境科学学院,浙江省水环境与海洋生物资源保护重点实验室;温州市农业科学研究院,温州市特色食品资源工程技术研究中心;
摘要：为了研究果胶酶与中性蛋白酶组合对羊栖菜多糖提取得率的影响及多糖产物的降血脂活性，本研究采用响应面法优化组合酶制备羊栖菜多糖的工艺，使用多糖纯化仪分离纯化多糖产物，通过扫描电子显微镜、傅里叶红外变换光谱及高效液相色谱法分析其理化性质，利用胆酸盐结合能力和抑制胰脂肪酶活性实验评估其体外降血脂能力，并在斑马鱼高脂血症模型中评价其体内降血脂活性。结果表明，组合酶法制备羊栖菜多糖的最佳工艺条件为：果胶酶和中性蛋白酶的比例4:1, pH5.5，温度50℃，加酶量2%，液料比25:1；分离纯化共得到4种羊栖菜多糖组分（SFP），其中SFP-4能有效结合胆酸盐（EC_(50)=0.3524 mg/mL）并抑制胰脂肪酶活性（IC_(50)=0.3568 mg/mL），具有最好降脂活性；进一步研究该组分的理化性质，发现SFP-4由岩藻糖、半乳糖、葡萄糖醛酸等七种单糖组成，具有孔隙结构和硫酸酯多糖的结构特征；在浓度为500μg/mL时能显著（P<0.01）降低斑马鱼体内脂质积累并下调脂肪酸合成相关基因mttp、pparg、fasn的表达，上调脂肪分解相关基因pparab和acaca的表达，与辛伐他汀具有相似降脂作用。因此，组合酶法提高了羊栖菜多糖得率，其多糖产物表现出了较好的降血脂活性，本研究为筛选制备降脂功能羊栖菜多糖的开发利用提供了理论依据。
关键词：组合酶;;羊栖菜多糖;;结构表征;;降血脂活性;;斑马鱼
基金资助：温州市重大科技创新攻关项目（ZN2022009）;; 温州市科技特派员团队项目（X2023105）;; 农业国家标准和行业标准修订项目（NYB-22270）
