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作者：白明健;周颖;程昊;边聪;李名正;李林;张春晶;
单位：齐齐哈尔医学院医学技术学院;
摘要：目的：探究中国弯颈霉菌丝体多糖(Tolypocladium sinense polysaccharide,TSP)的体外抗氧化活性和抑制过氧化氢诱导小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激导致的细胞凋亡。方法：采用热水浸提法提取中国弯颈霉菌丝体多糖，随后测定其超氧阴离子自由基(superoxide anion，·)、羟自由基(hydroxy radical，·OH)、对1,1-二苯基苦基苯肼自由基(P-1,1-diphenylpicryl phenylhydrazine radical,DPPH·)清除能力；采用200μmol/L过氧化氢(hydrogenperoxide, H_2O_2)诱导小鼠胰岛MIN6细胞氧化应激，给予高剂量和低剂量TSP(0.625、0.156 mg/mL)进行保护，MTT法测定MIN6细胞生存率；倒置显微镜观察细胞形态；采用试剂盒测定培养基中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平，细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量；流式细胞术检测细胞凋亡；Western Blot检测核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor2,Nrf-2)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-jun N-terminal kinase,pJNK)相对表达量。结果：TSP对于三种自由基具有显著的清除效果；细胞实验结果显示，与过氧化氢模型组相比TSP高低剂量给药组细胞生存率显著上升(P<0.01,P<0.05)；悬浮细胞数量极显著下降(P<0.01)；培养基中LDH极显著含量下降(P<0.01)；细胞凋亡率显著降低(P<0.01,P<0.05)；细胞内SOD水平显著增高(P<0.01,P<0.05)，丙二醛含量极显著下降(P<0.01);Western Blot结果显示相较于模型组，高剂量给药组Nrf-2表达量显著增高(P<0.05)，高剂量和低剂量给药组pJNK表达量显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论：TSP具有显著的抗氧化活性，能够通过调节Nrf-2和pJNK的表达来减少氧化应激导致的细胞凋亡。
关键词：中国弯颈霉;;多糖;;抗氧化活性;;氧化应激;;细胞凋亡
基金资助：黑龙江省卫生健康委科研课题（20210101060181）;; 黑龙江省省属本科高校基本科研业务费科技项目（2022-KYYWF-0784）;; 齐齐哈尔医学院研究生创新基金项目（QYYCX2022-05）;; 黑龙江省大学生创新创业训练计划项目（S202211230017）
