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作者：任翔;邹颜秋硕;汤晓召;杨菁;杨祖顺;
单位：云南省疾病预防控制中心;
摘要：目的：优化食品沙门氏菌环介导等温扩增检测技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)，更快更准确地检测食品中沙门氏菌，为食品中沙门氏菌的防控提供技术支撑。方法：根据沙门氏菌ttrRSBCA转座子中ttrA四亚硫酸还原酶亚基A基因，重新设计新的环介导等温扩增检测引物，通过与发表的invA1引物、invA2引物、invA3引物、bcfD引物及市售两款D牌及S牌检测试剂盒进行范围性实验、特异性实验、灵敏度实验，对该引物的LAMP检测方法进行验证。结果：重新设计的ttrA、ttrB-2、ttrA120-1引物在检测沙门氏菌方面具有较强的稳定性。在对14种非沙门氏菌检测中，引物ttrA120-1、引物bcfD和市售S牌检测试剂盒排他性达到100%。引物ttrA及市售D牌检测试剂盒排他性分别为64.3%和85.7%。invA1、invA3引物排他性为0%，特异性极差。在对26种不同血清型沙门氏菌检测时，引物ttrA120-1能有效检测23种沙门氏菌，检测包容性为88.5%。引物ttrA能有效检测22种沙门氏菌，包容性为84.6%。引物bcfD能够检测出19种沙门氏菌，包容性为73.1%。市售的D牌及S牌检测试剂盒分别能检测19种及20种沙门氏菌，包容性分别为73.1%和76.9%。灵敏度实验中，DNA浓度在3.2×10~(–5) ng/μL时，使用ttrA120-1引物可以正常检测。结论：引物ttrA120-1在灵敏性、特异性、检测能力上都优于文章所对比的市售试剂盒及所发表的引物序列，能够更准确、更高效地在食品沙门氏菌快速检测中进行运用。
关键词：食源性疾病;;沙门氏菌;;ttrA基因;;环介导等温扩增;;引物
基金资助：云南省重大科技专项(202002AE32005)
