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作者：于轶群;薛陆州;倪豪;蒋蕾;亢新鑫;盘赛昆;王淑军;
单位：江苏省海洋生物资源与环境重点实验室,江苏海洋大学;江苏省海洋生物技术重点实验室,江苏海洋大学;
摘要：潘糖是含α-1,6糖苷键的低聚异麦芽糖，α-葡萄糖苷酶是制备潘糖的关键酶制剂。本研究对深海热液口超嗜热古菌（Thermococcus siculi HJ21）中的α-葡萄糖苷酶序列进行合成，并克隆入载体pET29a，在大肠杆菌BL21中表达，通过His Trap HP层析柱纯化获得纯酶，以SDS-PAGE电泳测定α-葡萄糖苷酶分子量，并研究了酶的性质和其转糖苷作用。结果表明：该基因为729 bp，编码242个氨基酸，分子量约为27.2 kDa。该酶最适催化温度和pH分别为40℃和6.0。在以果糖为受体，与麦芽糖的比例为1:9，反应10 h时，其潘糖的生成量最高可以达到79.1%。研究结果为古细菌α-葡萄糖苷酶制备高纯度潘糖提供了依据。
关键词：α-葡萄糖苷酶;;克隆表达;;低聚异麦芽糖;;转糖苷;;潘糖
基金资助：重点研发-深海新型工业用酶的性能优筛和改造（2022YFC2805101）;; 江苏省高等教育优势学科（PAPD）
