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作者：孙婷婷;刘瑞鹏;杜鹏禹;易紫君;罗天珧;沙珊珊;邹莉;
单位：哈尔滨学院食品工程学院;东北林业大学林学院;
摘要：酿酒酵母是重要的工业菌株之一，提高其对环境胁迫的耐受性具有重要意义。利用逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术克隆了平菇MADS-box转录因子全长，使用序列分析工具TMHMM-2.0、MEGA等对其氨基酸序列进行分析，将平菇MADS-box基因通过同源重组方法插入到酵母表达载体pYES2中，转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中获得重组酵母，分别比较转平菇MADS-box基因酵母和对照酵母在H_2O_2、CdCl_2、低温–20 ℃和高温50 ℃胁迫处理后的生长状况。结果表明，平菇MADS-box转录因子cDNA全长1245 bp，编码414个氨基酸，属于MADS Superfamily，不具有信号肽和跨膜结构，亚细胞定位于细胞核；系统进化分析表明，平菇MADS-box蛋白与杏鲍菇(Pleurotus eryngii)亲缘关系最近；成功构建了酵母重组载体pYES2-Po-MADS，过表达平菇MADS-box基因后可提高重组酵母对氧化、重金属和高温等胁迫的耐受性。该研究为研发耐受性更强的酿酒酵母工业菌株奠定了理论基础。
关键词：酵母;;平菇;;MADS-box转录因子;;载体构建;;非生物胁迫
基金资助：黑龙江省自然科学基金联合引导项目(LH2022C054);; 黑龙江省重点研发计划指导类项目(GZ20230027)
