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作者：吴诗丽;谢莹莹;段雪凝;叶曼诗;徐玮琪;黄桂东;钟先锋;任红;
单位：佛山大学食品科学与工程学院;广东省传统发酵食品工程技术研究中心;广东省食品流通安全控制工程技术研究中心;佛山酿造技术工程技术研究中心;佛山农业生物制造工程技术研究中心;
摘要：为获得高效降解纤维素的菌种及酶资源，以传统发酵食品（白酒糟和酱醪）源微生物为研究对象。采用刚果红染色法平板筛选和3,5-二硝基水杨酸法酶活筛选产纤维素酶菌株，并对菌株进行菌落形态特征观察、生理生化特征试验及分子生物学鉴定，探究菌株在不同胁迫条件下产酶情况，以及菌株所产纤维素酶的酶学性质。结果表明，共筛选出了3株纤维素酶活相对较高的菌株，经鉴定均为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis），其羧甲基纤维素酶活力为109.37±6.89～125.97±4.37 U/mL。不同胁迫条件下菌株产酶性能表明：随着盐含量的增加，菌株酶活力呈下降趋势，当盐含量大于9%，酶活力仍能保留在20 U/mL，且随着盐含量的进一步提高，酶活力基本保持不变；在0%～8%的乙醇含量范围内，菌株酶活力呈先上升后下降的趋势，3株菌的酶活均大于80 U/mL，其中，菌株B12在乙醇含量为6%时酶活力最高，菌株JL39、JL55在乙醇含量4%时酶活力最高。纤维素酶酶学性质研究表明：菌株胞外纤维素酶最适反应温度为50℃；最适pH为5.5～6.5；金属离子Cu~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)对3株菌的酶活力都有促进作用，其中Cu~(2+)的促进作用最强，而Fe~(2+)、Mn~(2+)、Fe~(3+)和Ni~+对酶活力的作用各有所异。本研究为产纤维素酶菌株资源的开发利用提供了菌种资源，为抗逆性纤维素酶的高效应用提供了宝贵的酶资源，为生物质资源的转化和利用奠定了基础。
关键词：纤维素酶;;分子鉴定;;贝莱斯芽孢杆菌;;酶学性质
基金资助：国家自然科学基金（32302023,32372284）;; 广东省教育厅特色创新项目（2023KTSCX131）;; 广东省自然科学基金委（2022A1515140021,2023A1515012536）;; 广东省乡村振兴战略专项种业振兴行动项目（2023WPY00002）
