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作者：刘玫婷;毛丫;谢劲涛;刘文侠;吴立夏;吴移山;王媚;张学武;
单位：华南理工大学食品科学与工程学院;湛江市质量计量监督检测所;
摘要：为了高效快速获得大量具有抑制大肠杆菌潜能的莱茵衣藻多肽，用超高压辅助反复冻融法破碎莱茵衣藻细胞提取其中的蛋白质，再经过“胰蛋白酶-α糜蛋白酶”复合酶酶解和分段，获得分子质量不同的P3、P3-10和P10 3个多肽组分，并测定各组分对大肠杆菌的抑制能力；后筛选出活性最好的组分进行多肽分离、鉴定和序列解析，并利用PeptideRanker和Antimicrobial PeptideDatabase对可信度较高的肽序列进行活性预测，最后选择活性较好的多肽与大肠杆菌甲硫氨酰-t RNA合成酶的结晶体(PDB ID:6SPP)进行分子对接。结果显示：莱茵衣藻蛋白的得率为9.68%，蛋白质回收率为3.36 g/100 g干质量。P3组分抑制大肠杆菌的能力最好，0.25 mg/mL的P3对大肠杆菌抑制率为64.02%，对P3组分进行多肽序列解析能获得ALC>98%的多肽序列共25条，其中的DHRWE、DNRYW和SDRPF 3条肽序列有更强的抑菌潜能。用3条肽进行分子对接，结果显示DHRWE(ITScore Pe P=–146.1)和DNRYW(ITScore Pe P=–144.4)与6SPP的结合较稳定，有较强的抑制大肠杆菌的潜能，值得进一步探讨和开发。综上所述，研究结果既提供了大量具有较强抑制大肠杆菌潜能的多肽序列，为大肠杆菌天然抑菌剂的开发提供了数据基础，又建立了一种新颖高效的筛选抑制大肠杆菌肽的方法。
关键词：莱茵衣藻;;多肽;;大肠杆菌;;分子对接;;生物活性预测
基金资助：技术开发(合作)项目(D9225560)
