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作者：杨兴东;魏慧雅;曲扬;
单位：周口师范学院食品药品检验检测中心,生命科学与农学学院;河南科技大学食品与生物工程学院;
摘要：为了建立间接竞争ELISA法检测氧氟沙星（Ofloxacin,OFLX）在蜂蜜中的残留，本研究采用活性酯法将OFLX与载体蛋白偶联，得到抗OFLX完全抗原（OFLX-BSA）和检测抗原（OFLX-OVA）。采用OFLX-BSA免疫BALB/c小鼠，之后用杂交瘤等技术制备抗OFLX单克隆抗体。通过优化反应条件，建立间接竞争ELISA方法，并对该法的准确度、精密度和特异性进行判定。结果显示OFLX与载体蛋白偶联成功；得到一株抗OFLX的杂交瘤细胞株（3D7），单克隆抗体的IC_(50)值为1.17 ng/mL；该法在蜂蜜中的OFLX平均添加回收率为84.1%，其批间变异系数均大于批内的变异系数，与马波沙星的交叉反应率为52.9%，与其他竞争反应物没有交叉反应。本研究建立的间接竞争ELISA方法能够满足OFLX在蜂蜜中残留的测定需求。
关键词：氧氟沙星;;免疫原;;单克隆抗体;;酶联免疫吸附试验(ELISA);;蜂蜜
基金资助：河南省科技攻关项目（212102110094）;; 周口师范学院2022年中青年骨干教师资助
