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作者:周燕霞;曹悦;王青龙;郭淼;李庆尧;邓影妹;李龙;蔡雪凤;
单位:北京市食品检验研究院(北京市食品安全监控和风险评估中心);
摘要:目的:利用高通量测序技术建立动物源性物种鉴定方法。方法:对9种纯动物组织样本分别按比例进行肉糜和DNA混合,对2组混合提取的DNA样本进行条形码标记和文库制备。随后进行高通量测序和生物信息学分析,最后对DNA含量为1%的组合进行实时荧光PCR方法检测。结果:根据Summay结果分析,测序结果良好,6组肉糜混合的9种动物源性均被检出。8组DNA混合样本中,DM 7-2中的马未被检出,其他组合物种均被检出。各物种reads数比例与DNA最初混样比例基本一致。在实时荧光PCR实验中,DNA比例为1%的物种均能检测到,CT值在32~35之间。结论:初步建立动物源性鉴定的高通量测序方法,具有极高的准确性和稳定性,检测限达到1%(质量分数)。
关键词:高通量测序;;动物源性;;物种鉴定