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作者：谭敏颖;戴川景;卢学敏;王毅刚;关磊;程勇;
单位：浙江理工大学生命科学与医药学院;浙江天草生物科技股份有限公司;
摘要：目的：骨关节炎（Osteoarthritis,OA）是一种常见的慢性关节性疾病，本研究旨在探究银耳多糖对骨关节炎细胞模型人软骨细胞T/C-28a2的增殖效应和抗炎作用。方法：通过MTT(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)和结晶紫染色实验检测银耳多糖对T/C-28a2细胞增殖活力和细胞毒性的影响；用脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）处理T/C-28a2细胞建立骨炎症模型，酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测药物处理后细胞白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的表达；利用蛋白免疫印迹（Western blot）检测药物处理后相关骨保护因子和炎症因子的表达；通过ROS活性氧释放实验检测药物对细胞的氧化应激水平和抗炎症反应。结果：银耳多糖能够促进人软骨细胞T/C-28a2的增殖活力，且没有明显的细胞毒性；使用LPS刺激软骨细胞模拟骨炎症的环境，药物处理后发现银耳多糖和硫酸软骨素处理能减少IL-6分泌从而抑制炎症发生；进一步Western blot检测发现银耳多糖刺激后，相关骨保护因子（Osteoprotegerin,OPG）的表达上调，而促凋亡相关蛋白Bax、细胞外信号调节激酶（Extracellular-signal-regulated kinases,ERK-MAPK）和核内转录因子κB(Nuclear factor-kappaB,NF-κB)的表达下调。活性氧（Reactive oxygen species,ROS）释放实验结果显示，银耳多糖和硫酸软骨素能够抑制细胞内ROS水平，抑制炎症反应的发生。结论：银耳多糖具有抑制骨关节炎的效用，可以在一定程度上保护软骨组织，抵抗细胞凋亡。本研究初步探讨了银耳多糖的抗炎作用及机制，为开发银耳多糖作为抗炎药物提供初步的实验依据。
关键词：银耳多糖;;骨关节炎(OA);;脂多糖(LPS);;活性氧(ROS);;骨保护因子(OPG);;软骨细胞;;细胞凋亡
基金资助：浙江省领军型创新创业团队项目（2022R01015）;; 浙江理工大学教学科研骨干培养计划（20200511）
